度他雄胺含量检测方法验证方案概述.doc

1 目的 确保含量检测方法准确。 2 范围 成品含量检测方法方法学的验证。 3 验证小组成员及职责 成 员 姓 名 部 门 职 务 工作分工 负责人 刘晓红 分管质量 副总 批准验证方案 审核 QA QA科长 负责对方案及报告进行型式审核 组长 邓福英 QC QC科长 组织协调和实施验证工作 组员 组员 4 验证依据 ICH Q25 验证内容 5.1 验证可接受标准项目 指标 方法专属性 稀释剂空白实验 不干扰供试品测试 潜在杂质加入实验 主峰与峰间分离度大于1.5 系统适用性 主峰理论塔板数 大于000 盐酸厄洛替尼主峰峰面积相对标准偏差 ≤% 回收率 回收率在99.0%～101.0%之间 验证范围内的线性测定 相关系数大于0.999 重复性 ≤.0% 中间精密度(相对标准偏差) ≤.0% 准确度 回收率9.0%～1.0% 溶液稳定性 RSD≤.0% 5.2.1 色谱条件 仪器：高效液相色谱仪：ZORBAX SB-CN，4.6×250mm，5μm 流动相：正己烷：异丙醇=95：5：1.5ml/min ：240nm：20μl 柱 温40℃ 5.2.2 实验用溶剂及供试品 名称 批号 含量/级别 来源 正己烷 异丙醇 杂质A 杂质C 度他雄胺 度他雄胺对照品 5.2.3 溶液的配制 5.2.3.1 流动相的配制 正己烷：异丙醇=95：55.2.3.2 供试品溶液的配制 供试品溶液的配制：取供试品约25mg，精密称定，置50ml量瓶中，加5ml异丙醇超声使溶解，再加正己烷稀释至刻度，摇匀，即得。（平行配制两份） 对照溶液配制：取对照品约25mg，精密称定，置50ml量瓶中，加5ml异丙醇超声使溶解使溶解，再加正己烷稀释至刻度，摇匀，即得。（平行配制两份）测定方法测定法：分别精密量取对照品溶液和供试品溶液0μl，注入高效液相色谱仪，理论板数按峰计算应不低于000，按外标法以峰面积计算供试品中的含量。计算公式： 式中： As——供试品溶液中主峰峰响应值； s——供试品，mg； Ar——对照品溶液中主峰峰响应值； r——对照品，mg； ——供试品的，％； Ps——对照品的含量，％。 结果判断：%～102.0%之间，则判为符合规定。 5.3 专属性5.4 系统适性 5.4.1 目的 确认用该仪器系统运行含量测试方法的验证是否符合要求。 5.4.2 操作步骤 取对照品约mg，置50ml量瓶中，加5ml异丙醇超声使溶解，再加正己烷稀释至刻度，摇匀，分别为对照品R1溶液和对照品R2溶液。取对照品R1溶液连续进样6次，记录色谱图，计算主峰面积的RSD%及主峰理论塔板数取对照品R2溶液连续进样2次，记录色谱图，与对照品R1溶液计算回收率。 测试结果表 系统适应性测试数据名称 进样次数 主峰峰面积 主峰理论塔板数 对照品R1溶液 1 2 3 4 5 6 平均 RSD% —— —— 对照品R2溶液 1 2 平均 回收率 5.4.4 结论 5.5 线性（～%） 5..1 目的 确定在验证范围内，供试品浓度与峰面积之间的线性关系。 操作步骤 精密称取本品对照品 mg，置50ml量瓶中，加异丙醇超声使溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取该溶液各2.5ml、3.75ml、5.0ml、6.25ml、7.5ml分别置50ml量瓶中，加稀释剂稀释至刻度，依次制成线性溶液（相对标准浓度50%、75%、100%、125%、150%）。分别取上述溶液各20μl进样，每份溶液平行测定2次，记录色谱图，计算每个浓度点的峰面积平均值。以样品浓度对相应平均峰面积做线性回归，计算回归方程及相应的线性回归系数。KX+b。 5.5.3 测试结果 表 盐酸厄洛替尼线性测试编号 1 2 3 4 5 相对浓度 50% 75% 100% 125% 150% 浓度（μg/m） 峰面积 1 2 平均值 回归方程 相关系数 5.5.4 结论 5. 重复性 5..1 目的 确定对于相同供试品多次称样测定结果的重现程度。 5..2 操作步骤 对照品溶液A：精密称取本品对照品25mg置50ml量瓶中，加稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀对照品溶液B：精密称取本品对照品25mg置50ml量瓶中，加稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀80%样品溶液配制：取本品约20mg，精密称定，置50ml量瓶中，加5ml异丙醇超声使溶解，再加正己烷稀释至刻度，摇匀，即得（平行配制3份）。 100%样品溶液配制：取本品约25mg，精密称定，置