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一、问答题
食用油长时间放置后,为什么会有异味?
不饱和脂肪酸被氧化或水解的过程和现象,酸败的食物具有难闻气味和难吃味道。油脂长时间暴露于温热和潮湿的环境中,会产生所谓的臭油味。这些臭油味就是由于脂肪被氧化或水解而产生的:水解酸败从脂肪里的脂肪酸链中把甘油结构分解出来,并继续被水解或氧化。
为什么有的抑制剂虽不与底物结合部位结合,但仍表现出竞争性抑制?
1.反竞争性抑制:抑制剂不能与游离酶结合,但可与ES复合物结合并阻止产物生成,使酶的催化活性降低,称酶的反竞争性抑制。其特点为:a.抑制剂与底物可同时与酶的不同部位结合;b.必须有底物存在,抑制剂才能对酶产生抑制作用;c.动力学参数:Km减小,Vm降低。2. 非竞争性抑制:抑制剂既可以与游离酶结合,也可以与ES复合物结合,使酶的催化活性降低,称为非竞争性抑制。其特点为:a.底物和抑制剂分别独立地与酶的不同部位相结合;b.抑制剂对酶与底物的结合无影响,故底物浓度的改变对抑制程度无影响;c.动力学参数:Km值不变,Vm值降低。.
分离步骤 总蛋白含量(mg) 活力单位数 1.
2.
3.
4.
5.
6. 粗分离
盐析
等电点分离
离子交换
亲和层析
分子筛层析 20,000
5,000
4,000
200
50
45 4,000,000
3,000,000
1,000,000
900,000
750,000
675,000 回答下列问题:
(1).在这六步分离纯化过程中,哪一步分离效果最好?哪一步最差?第四步最好,第三步最差
(2).该酶是否已经纯化?还可以用什么方法确定其是否纯化?
已经纯化,因为最后一步酶活力的减少与总蛋白的减少是等比例的。 电泳,测N或C端的氨基酸
在阳离子交换层析中,下列各组氨基酸,用pH=7.0的缓冲液洗脱.哪一个氨基酸先洗脱下来?(阳离子交换层析:带正电的脱去)
(1).Asp-Lys. (2).Arg-Met. (3).Glu-Val. (4).Gly-Leu. (5).Ser-Ala.
12. 测定酶活力的时候为啥采用初速度?
速度在时间足够长以后会变慢,导致测速误差
蛋白质,核酸发生变性的共同特点是什么?
共同:高级结构的破坏
试解释酶为什么具有立体特异性。
立体特异性:对底物要求不同 活性中心的形状
蛋白质因变性发生沉淀作用和盐析发生沉淀作用,两者本质上有何差别?如何区分?
变性:破坏蛋白质的三级结构, 盐析:破坏蛋白质表面,蛋白质并未变性
在给定的pH下,下述蛋白质在电场中向哪个方向移动,即向正极、负极还是不动?
蛋白质的等电点
卵清蛋白(pI=4.6),在pH5.8;带负电,往正极(2)β-乳球蛋白(pI=5.2),在pH4.6和pH7.1;9带正电,往负极
(3)胰凝乳蛋白酶原(pI=9.1),在pH5.6和pH9.1和pH11。不动
17. 有二个DNA样品,分别来自两种未确认的细菌,两种DNA样品中的腺嘌呤碱基含量分别占它们DNA总碱基的32%和17%。这两个DNA样品的腺嘌呤,鸟嘌呤,胞嘧啶和胸腺嘧啶的相对比例是多少?(A=T、C=G)其中哪一种DNA是取自温泉(64℃)环境下的细菌,哪一种DNA是取自嗜热菌?答案的依据是什么?
C、G含量高的菌,因为氢键多
18. 下列变化对肌红蛋白和血红蛋白的氧亲和性有什么影响?(1)血液中的pH由7.4下降到7.2。氧亲和性减少(2)肺部CO2分压由6kPa(屏息)减少到2kPa(正常)。增加(3)BPG水平由5mM(平原)增加到8mM(高原)。下降
19. 假设某蛋白质含有10个羧基和10个氨基(平均羧基PK值为2.5,氨基PK值为8.5),并假设在一定条件下氨基和羧基间都有可能生成盐键.请按下表所示不同PH条件下,填上可能生成盐键的数目.
溶液的PH值 1.0 2.5 5.5 8.5 10.0 生成盐键的数目 0 20. 画写具有米氏行为酶的下列各动力学曲线示意图.
A.反应速度(v)对底物浓度[s]作图.
B.当[s]》[E]时,反应速度(v)对酶浓度[E]作图.
C.反应速度(v)对温度(T)作图.
D.1/v对1/[s]作图.
E.产物浓度[p]对时间(t)作图.
21. 100毫升,pH1.72,0.1M的甘氨酸溶液用2M NaOH滴定。记录pH并绘制滴定曲线如下图。滴定曲线上有Ⅰ到Ⅴ五个重要的点。为下面的每段话从中选择一个合适的点。并加以说明。
甘氨酸主要以H3N-CH2-COOH的形式存在。
甘氨酸的净电荷是+?。
一半的氨基是离子化的。
此时的pH等于羧基的pKa值。
此时的pH等于氨基的pKa值。
甘氨酸具有最大的缓冲能力。
甘氨酸的净电荷是零。
羧基完全被滴定。
甘氨酸完全被滴定。
甘氨酸主要以H3N+-C
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