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碱性血红蛋白电泳说明书
意大利Interlab公司
Via Rina Manti,26-00155 Roma
+39-06-227.54.350
用途:
此碱性血红蛋白电泳试剂的包装是用于696PC系统的电泳试剂,此试剂可对人类的正常血红蛋白如H-A,H-A2和H-F通过琼脂糖凝胶的方法进行定性和定量的分离,以及可检测出异常的血红蛋白如S,C,D,E等
概述
血红蛋白合成受遗传基因的控制,并且异常血红蛋白的出现会引起红细胞形态和功能的变性。
血红蛋白是由珠蛋白肽链和含有铁的原卟啉组成。
正常的血红蛋白结构相似,分子量在67000道尔顿左右,由两对珠蛋白肽链和1个亚铁血红素组成。
HbA: 多肽链 2(和2(
HbA2: 多肽链 2(和2(
HbF: 多肽链 2(和2(
正常成人血红蛋白中,HbA占总蛋白浓度的98%,HbA2和HbF相对数量少些。
珠蛋白肽链中某一氨基酸被其他氨基酸所取代会导致Hb变异即可出现血红蛋白病。目前可鉴定出600多种变异的血红蛋白即结构变异的血红蛋白(S 、C、 E、 D、 G、 H、 I 、Lepore等)。在异常的血红蛋白中约有60%血红蛋白会有电荷差异,这样可用电泳的方法对这些血红蛋白进行鉴定。HbC和HbS是两种常见的变异的血红蛋白。HbA伴随有S,C,E等变异的血红蛋白出现称为杂合子血红蛋白病如AS或AC等。
只有一种变异的血红蛋白的出现称其为纯合子血红蛋白病如HbS病、HbC病等。这些变异的血红蛋白一般可导致地中海贫血。纯合子型血红蛋白病可引起一系列的临床症状。
碱性血红蛋白电泳主要用于分离正常血红蛋白如HbA、HbA2和异常或变异的血红蛋白(HbS、“快速”血红蛋白和D、C、E)。然而,在碱性Hb电泳中,一些正常的和异常的血红蛋白有相同的迁移率即这些蛋白质在同一位点(如HbA2与HbC,HbS与HbD)
琼脂糖酸性血红蛋白电泳可确定HbS或HbC。
原理:
根据蛋白质亚结构的电荷分布,在一定的PH值条件下,蛋白质分子可表现出有极性或非极性。
在琼脂糖凝胶电泳中,蛋白质分子根据分子量和等电点的不同而被分离出来。
电泳结束后,用氨基黑染料染色,可看到电泳结果。
警告: 此包装仅用于体外诊断
操作仪器
Interlab碱性血红蛋白电泳的试剂包装,货号为SRE604K在Microtech696PC仪器下可实现全自动分析。
试剂:
请参照使用者手册和手册中的图表来进行试验前的准备
试剂的保存:
所有的试剂储存在室温15-30°C.在有效期的范围内所有的试剂都是稳定的。有效期过后,不宜再使用此试剂。
琼脂糖凝胶片
成分:琼脂糖、巴比妥缓冲液、防腐剂、稳定剂
应用前的准备:此胶片可直接使用。
存储和稳定性:储存在室温15(到30(C,胶片在有效期内稳定。有效期过后,勿使用此胶片
勿将此胶片冰冻保存
注意:胶片必须保持水平放置
试剂变质的标志:
-在胶片包装里面有液体出现
-胶片的厚度不均
-有细菌生长
注:胶片表面吸水后出现波纹状为正常现象,可正常使用。
R: 22 吞咽有害 R: 36/38 损坏皮肤和眼睛 S: 26 一旦眼睛接触到,需立刻用大量清水清洗 S: 28 一旦皮肤接触到,需立刻用大量清水清洗 S: 46 如果吞咽,需立刻找医生就诊
2、酸蓝染料
成分:醋酸溶液中含有奈酚蓝浓缩液.
应用前的准备:此染液直接使用
存储和稳定性:储存在室温15(到30(C。浓缩液在有效期内稳定;工作液(稀释后的染液)储存时瓶盖要盖紧并在室温15(到30(C条件下稳定6个月。工作液用过10次染色循环后即染过10张胶片后应不能再使用。厂家建议,每五张胶片更换染液,保证无沉淀并染色效果良好。
试剂变性标志:无
R: 10 易燃 R: 35 引起严重烧伤 R: 36/37/38 对眼睛、呼吸系统及皮肤有刺激作用 S: 23 勿呼吸挥发气体 S: 26 一旦眼睛接触到,立刻用大量清水清洗 S:37/39 应戴保护手套及防护眼镜
3. 含有缓冲液的海绵
缓冲液成分: 含有巴比妥的碱性缓冲液及防腐剂
使用前的准备:直接使用
存储和稳定性:储存在室温15(到30(C,缓冲绵条在有效期内稳定。有效期过后,勿使用。
缓冲液:巴比妥缓冲液(PH值为碱性)、防腐剂
试剂变性标志:如果试剂包装已被打开或缓冲绵条是干燥的则勿使用。绵条有黑色或黄色污点出现不会影响实验结果。
警告:
R: 25 吞咽有毒性 R: 36/38 对皮肤及眼镜有刺激性 R: 52 对水生生物有害 S: 26 一旦眼睛接触到,需立刻用大量清水清洗 S: 46 如果吞咽,需
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