消毒剂消毒效果及有效期验证方案程序.doc

目 录 1.概述 2.验证范围 3.验证目的 4.验证参考文件 5.验证小组名单 6.验证小组职责 7.验证内容 8.结论与评价 9.再验证周期 1. 概述 本公司的洁净区分为A级、B级、C级和D级，拟定用于洁净区表面消毒的有三种消毒剂：75%乙醇、0.1%新洁尔灭溶液、2%甲酚皂 1.2. 消毒剂的种类、消毒对象、消毒方法和有效期见 名称 消毒对象 消毒方法 有效期 1 75%乙醇 用于设备表面、器具和手消毒。 采用擦拭或喷洒方式 密闭保存 7天 2 0.1%新洁尔灭溶液 用于地面、墙面、器具、清洁布、拖布和洁净鞋的消毒 采用擦拭或浸泡方式 密闭保存 7天 3 2%甲酚皂 用于液封 密闭保存 7天 备 注 以上消毒剂浓度均为体积分数比 1.3. 作用对象一样的消毒剂每月轮换使用，避免表面微生物产生耐药菌株。在利用消毒剂进行表面擦拭消毒过程中消毒剂的作用时间应不少于10分钟，利用消毒剂进行浸泡消毒的不少于5分钟。 B级区使用的消毒剂需经0.22μm过滤。 《药品生产验证指南》（版）《消毒技术规范》（20年版）《中国药典》（2010年版）《现代医药工业微生物实验室质量管理与验证技术》 姓 名 职务/职称 部 门 *** 经理 质量部 成 员 *** 车间主任 生产部 *** QC主管 质量部 *** QC 质量部 *** QA主管 质量部 6. 验证小组职责 7. 验证内容 验证前参与实施验证的人员必须已经接受本方案的培训且考核合格。验证前准备 菌种 试验微生物以金黄色葡萄球菌作为细菌繁殖体中化脓性球菌的代表；大肠杆菌作为细菌繁殖体中肠道菌的代表；白色念珠菌作为致病性真菌的代表。在上述规定的菌、毒株的基础上，根据消毒剂特定用途或试验特殊需要，还可增选其他菌、毒株。 75%乙醇、2%甲酚皂为中效消毒剂，0.1%新洁尔灭为低效消毒剂，均不具备杀灭细菌芽孢功能，根据上述内容，本次验证所用菌种见：序号 名称 序列号 类别 1 金黄色葡萄球菌 CMCC(B)26 003 细菌 2 大肠埃希菌 CMCC(B)44 102 细菌 4 白色念珠菌 CMCC(F)98 001 真菌 可接受标准：标准菌种必须来源可靠、来源可溯、保存方法与条件合适。使用的标准菌种不能超过第五代 应确认菌种名称、来源、代数，培养基见：序号 名称 备注 1 营养琼脂培养基 121℃，15min灭菌备用 2 玫瑰红钠琼脂培养基 121℃，15min灭菌备用 121℃，15min灭菌备用 稀释液、冲洗液：0.9%无菌氯化钠溶液、pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液 。 可接受标准：所有试剂、培养基的规格、数量和保存条件满足要求，且在有效期内；脱水培养基呈流动粉末状，无结块，无潮解，且在有效期内。试剂/培养基检查确认记录消毒剂配制： 按进行消毒剂配制。 0.1%新洁尔灭溶液、75%乙醇溶液、2%甲酚皂 菌液制备取金黄色葡萄球菌接种于营养肉汤培养基中，于30～35℃培养18～24h即得，培养后微生物浓度应不少于10fu/ml。取白色念珠菌接种于改良马丁液体培养基中，于23～28℃培养24～48h即得，培养后微生物浓度应不少于10cfu/ml。 将配制好的0.%新洁尔灭溶液（或75%乙醇溶液或2%甲酚皂按9ml/支分注于27支无菌具塞试管中，按照“5分钟组”、“10分钟组”和“15分钟组”共3组每组9支，进行分组编号。取供试菌液（10cfu /ml的金黄色葡萄球菌菌液，10cfu /ml的菌菌液105cfu /ml的白色念珠菌菌液）1ml按照下表，分别接入到盛有9ml0.%新洁尔灭溶液（或75%乙醇溶液或2%甲酚皂的试管中（已进行10倍稀释），轻轻摇动，混合均匀，并立即开始计时。5分钟组 10分钟组 15分钟组 金黄色葡萄球菌 1ml/支，共3支 1ml/支，共3支 1ml/支，共3支 1ml/支，共3支 1ml/支，共3支 1ml/支，共3支 白色念珠菌 1ml/支，共3支 1ml/支，共3支 1ml/支，共3支 分别在分钟、分钟和分钟取接种细菌的消毒液，倾入过滤杯滤过，然后各用0.9%无菌生理盐水50ml清洗滤膜，滤过，重复用50ml0.9%无菌生理盐水的洗涤共3次。取下滤膜，含细菌的膜放入营养琼脂平板内，含真菌的膜放入玫瑰红钠琼脂平板内，含菌膜面向上。细菌于3℃的生化培养箱内培养，真菌于2℃的霉菌培养箱内培养。培养后在明亮处，对平板上的菌落数进行计数，记录计数结果。 阳性对照分别将10cfu/ml金黄色葡萄球菌液、10cfu/ml大肠埃希菌菌液105cfu/ml的白色念珠菌菌液稀释至浓度为10～100cfu/ml，取稀释1ml于平皿中，倾注冷却至45℃营养琼脂培养基和玫瑰红钠琼脂培养基