【骄子之路】2017高考生物一轮复习 第十单元 生物技术实践 专题36 生物技术在其他方面的应用课件（选修1）.pptVIP

栏目导航 基础自主复习 一、植物的组织培养技术 1．菊花的组织培养 (1)理论基础：植物细胞的①________。 (4)实验操作步骤 制备MS培养基→外植体消毒→?________→培养→?_______→栽培 2．月季的花药培养 (1)理论基础：花粉具有?______________。 (2)花粉发育过程：四分体时期、单核期、双核期等阶段。 2．胡萝卜素的提取 考点分类透析 1.植物组织培养的过程 (1)菊花组织培养过程 菊花组织形成愈伤组织长出丛芽―→生根菊花植株。 (2)月季的花药培养 2．影响植物组织培养的因素及成功的关键 (1)影响因素 ①内部因素：材料的选取。 ②外部因素：营养成分的种类及配比；植物激素的用量及使用顺序；pH、温度、光照等。 (2)获得成功的关键 ①植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗逆性差，对培养条件要求较高。 ②培养材料一旦被微生物污染，就会导致实验失败。原因是微生物增殖快，生长迅速，消耗养分多，并产生代谢废物毒害培养材料。 ③无菌技术主要包括对操作空间、实验用具、实验材料以及操作者的消毒灭菌。 名师提醒 一旦发现培养物被污染，特别是真菌性污染，一定不要打开培养瓶。应先将被污染的培养瓶统一放在高压蒸汽灭菌锅内进行高压蒸汽灭菌，然后再打开培养瓶进行清理。 3．植物激素在组织培养过程中的重要作用 生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，其作用及特点为： 在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势。 使用顺序不同，结果不同，具体如下： 名师提醒 (1)在剥离花药时，要尽量不损伤花药，否则接种后容易从受伤部位产生愈伤组织，同时还要彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。 (2)花药开裂长出愈伤组织或释放出胚状体时，应及时转移到分化培养基上。 1.细胞内DNA复制与体外DNA扩增(PCR技术)的比较 2.PCR反应的过程及结果 (1)PCR反应过程 ①变性：当温度上升到90 ℃以上时，双链DNA解聚为单链(如下图)。 ②复性：系统温度下降至50 ℃左右时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合(如下图)。 ③延伸：当系统温度上升至72 ℃左右，溶液中的四种脱氧核苷酸(A、T、G、C)在DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链(如下图)。 (2)结果 ①PCR一般要经历三十多次循环，每次循环都包括变性、复性、延伸三步。 ②两引物之间的固定长度的DNA序列呈指数扩增。 名师提醒 DNA复制需要引物的原因：DNA聚合酶不能从5′端开始合成DNA，而只能从3′端延伸DNA链。 1.常用的蛋白质分离方法 (1)凝胶色谱法 ①识图 ②分析比较列表如下： (2)电泳法原理 ①在一定pH下，一些生物大分子(如多肽、核酸等)可解离的基团会带上正电或负电，在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。 ②由于分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状不同，使带电分子产生不同的迁移速率，从而实现样品中各种分子的分离。 2．血红蛋白的提取和分离 3．结果分析与评价 (1)血红蛋白的提取和分离时红细胞分层不明显，可能是洗涤次数少、未能除去血浆蛋白的原因。此外，离心速度过高和时间过长，会使白细胞和淋巴细胞一同沉淀，也得不到纯净的红细胞，影响后续血红蛋白的提取纯度。 (2)凝胶的装填标准是紧密、均匀。如果色带均匀、狭窄、平整，说明凝胶色谱柱的性能良好。如果色谱柱出现纹路或是气泡，轻轻敲打柱体以消除气泡，消除不了时要重新装柱。 (3)G-75：“G”代表凝胶的交联程度，膨胀程度及分离范围，75表示凝胶得水值，即每克凝胶膨胀时吸水7.5 g。 (4)装填完后，立即用洗脱液洗脱的目的是使凝胶装填紧密。 (5)实验过程中加入柠檬酸钠的目的是防止血液凝固；低速、短时离心防止白细胞沉淀；缓慢搅拌防止红细胞破裂释放出血红蛋白。 (6)检测血红蛋白的分离是否成功的方法：如果凝胶色谱柱装填得很成功、分离操作也正确，能清楚地看到血红蛋白的红色区带均匀、狭窄、平整，随着洗脱液缓慢流出；如果红色区带歪曲、散乱、变宽，说明分离的效果不好，这与凝胶色谱柱的装填有关。 名师提醒 “血红蛋白的提取和分离实验”中的注意事项 ①红细胞的洗涤：洗涤次数不能过少，否则无法除去 血浆蛋白；要低速、短时离心，否则会使白细胞等一同沉淀，达不到分离的效果。 ②凝胶的预处理：用沸水浴法不但节约时间，而且除去凝胶中可能带有的微生物，排除胶粒内的空气。 ③色谱柱的装填：装填时尽量紧密，减小颗粒间隙；无气泡；洗脱液不能断流。 ④色谱柱成功的标志：红色区带均匀一致地移动。 1.几种物质的提取方法、原理及步骤 名师提醒 不同物质的提取是根据其理化性质的不同来进行的，因此