猪细菌、病毒病检疫.pptVIP

1．国内标准 《猪传染性胸膜肺炎检疫技术规范》（SN/T 1447-2011）对细菌分离和鉴定、聚合酶链式反应、补体结合试验、阻断ELISA等实验室检测的规定。 细菌/病毒性猪病鉴定 主要猪病检测项目 猪瘟 非洲猪瘟 口蹄疫 高致病性蓝耳病 伪狂犬 传染性胃肠炎 传染性胸膜肺炎 流行性腹泻 一、猪瘟 猪瘟（Swine Fever SF）是猪的一种高度接触性传染病,在欧洲称为古典猪瘟（Classical Swine Fever ,CSF）。猪瘟病毒（Classical swine fever virus ,CSFV）是黄病毒科（Flaviviridae）的瘟病毒属（Pestivirus）的一个成员。瘟病毒是具有囊膜的正链小RNA病毒。这个属的成员还有在抗原性和结构密切相关的牛病毒性腹泻病毒（Bovine viral diarrhea virus，BVDV）和羊边界病毒（Border disease virus，BDV）。CSFV与BVDV之间的基因组具有高度同源性，抗原关系密切，有血清学交叉反应。 主要检测方法：病毒分离与鉴定、免疫过氧化物酶结合试验（IPMA）、间接免疫荧光试验（IFA）、间接酶联免疫吸附试验（ELISA）、血清中和试验（SN）、荧光定量RT-PCR检测（SYBR-Green I） 国际标准：OIE《陆生动物诊断试验和疫苗手册》 国内标准GB/T16551-2008《猪瘟诊断技术》、GB/T27540-2011《猪瘟病毒实时荧光RT-PCR检测方法》、SN/T1379-2010《古典猪瘟检疫规程》 对于活猪，进行全血病毒和血清中抗体的检测是CSFV诊断的必选方法。因此，检测病死猪器官样品中的病毒或抗原是最适宜的诊断方法。由于经常在种猪中监测到抗反刍兽瘟病毒病原抗体，因此筛选试验后必须进行确诊，选用适当的方法鉴别BVD、边界病病毒和CSFV抗体的试验极为重要。过氧化物酶标中和试验（NPLA），荧光抗体病毒中和试验（FAVN）和酶联免疫吸附试验（ELISA）适合。三种试验敏感性和特异性较高，NPLA和ELISA结果可用肉眼观察，也能通过仪器自动测定。 根据不同的检测方法，采集不同的样品： 荧光抗体试验：采集扁桃体、脾、肾和回肠远端，并在无防腐剂的冷藏条件下运送，样品不能冻结。 病毒分离和分子生物学检测：扁桃体为首选器官，也可采集全血（抗凝）、血清、淋巴结和脾。 抗体检测：采集感染猪血清，样品应保持低温运输。 检测技术概述 试剂盒名称 国家及其公司 HerdChek? CSFV抗体检测试剂盒 美国IDEXX公司 阻断ELISA，检测猪血清及血浆中的CSFV抗体 HerdChek? CSFV抗原检测试剂盒 美国IDEXX公司 抗原捕获ELISA，用来检测猪外周血白细胞、全血、细胞培养物、和组织培养物中的特异性CSFV抗原 CHEKIT 猪瘟病毒血清抗体检测试剂盒 美国IDEXX公司 间接ELISA，针对E2糖蛋白，适用于区分猪瘟病毒感染与牛病毒性腹泻病毒和边界病病毒猪群。 CHEKIT 猪瘟病毒抗原检测试剂盒 美国IDEXX公司 抗原捕获ELISA，该试剂盒与抗体检测试剂盒联合使用可在感染后前两周检测到病毒。 CHEKIT 猪瘟病毒标记检测试剂盒 美国IDEXX公司 官方允许使用于欧盟成员国，用来区分E2亚单位疫苗（Erns抗体阴性）接种猪于猪瘟病毒感染猪（Erns抗体阳性） Ceditest?CSFV抗体检测试剂盒 荷兰Prionics Lelystad公司 竞争ELISA（针对E2蛋白） Ceditest?CSFV2.0抗体检测试剂盒 荷兰Prionics Lelystad公司 阻断ELISA Ceditest?CSFV2.0抗原检测试剂盒 荷兰Prionics Lelystad公司 双抗体夹心ELISA Ceditest?CSFV2.0抗体Erns检测试剂盒 荷兰Prionics Lelystad公司 阻断ELISA CIVTEST SUIS HC/PPC 西班牙海博莱生物大药房 竞争ELISA 部分商品化CSFV检测ELISA试剂盒 二、非洲猪瘟 非洲猪瘟（african swine fever，ASF）是猪的一种DNA病毒病，是非洲猪瘟病毒科非洲猪瘟病毒属中的唯一成员。其特征是死亡率高，皮肤有变红的区域和内脏器官严重出血。其病型可分为最急性型、急性型、亚急性型、慢性型和隐性型。临诊症状和古典型猪瘟十分相似。 1．国际标准 OIE《陆生动物诊断试验和疫苗手册》（2008）第2.1.12章《非洲猪瘟》规定了国际贸易中推荐使用的检测技术，包括病毒分离与鉴定、PCR、ELISA等。 2．国内标准 国家标准：非洲猪瘟诊断技术GB/T 18648-2002 行业标准：非洲猪瘟检疫技