实验动物基本操作重点分析.ppt

动物实验基本操作技术 温州医学院实验动物中心 为了确保实验研究结果的可靠性、准确性和可重复性，必须掌握规范的动物实验操作技术。 娴熟的动物实验操作技术和技巧，是实验研究的保证。 动物具有自卫能力，不会讲话，不领人情，更不会自动服从。 减少动物的应激反应或伤害，避免实验人员出现意外和受伤。 实验前准备 理论准备： 了解动物实验基础知识 查阅关于实验方法的参考文献 制定研究计划和方案 条件准备： 动物、仪器、器械、药品 实验场所和饲养场所 实验动物的抓取与固定 性别鉴定 年龄的大致判断 妊娠检查 分组与编号 第一节 实验动物的抓取与固定 原则： 安静环境 动作轻柔和熟练 善待动物： 多一份爱就多一份收获 小鼠 大鼠 豚鼠 家兔 狗 猫 猴 第二节 性别鉴定 实验设计时有雌雄各半、雌雄不拘等。 性成熟后，雌雄动物易区分： 外生殖器 第二性征 新生动物？冬季天冷时的兔子？ 第三节 年龄的大致判断 提供实验动物时要有动物出生和生长记录。根据卡片记录来准确判断年龄。 如无记录则要根据该动物的生长曲线、牙齿、爪子或者毛色特征来大致判断。 常用实验动物成年体重 小鼠 豚鼠 一般年幼豚鼠牙齿短而白，爪软而短，眼睛圆亮，行动活泼，被毛有光泽，且紧贴身体 。而老年豚鼠则相反，牙齿和爪均较长，眼睛朦胧，行动迟缓。 可根据体重粗略地判断年龄。同日龄豚鼠，雌性体重略高于雄性。实验对年龄要求比较严格时，必须由卡片记录提供准确年龄。 兔 年龄判断的重要标志：门齿和爪。 门齿： 青年兔：洁白、短小、整齐。 老年兔：暗黄、厚长、不整齐、破损。 趾爪： ＜1岁，红多于白， =1岁，红色与白色相当， ＞1岁，白多于红色。 另外，家兔皮薄而紧，眼神明亮，行动活泼的为青年兔；皮厚而松，眼神颓废，行动迟缓的为老年兔。 狗 主要依据牙齿的生长情况、磨损程度、外形、 颜色等来综合鉴定: 20—30 天开始长牙，第 10 个月牙 齿已全部长出。 随着年龄的增长，乳齿脱落而长出恒齿。2-4个月，更换门齿，5—6 个月更换犬齿。 幼年狗的牙齿洁白而无磨损，1—2 岁时，下 颌的前门齿逐渐被磨损，2—3 岁时，前门齿的尖锐端被磨损而消失。而上颌 前门齿在 2—3 岁时才开始磨损。在 4—5 岁时，其尖锐端也被磨损消失，且 牙齿发黄。到 10—12 岁时，牙根全部磨损。 第四节 妊娠检查 临床检查和实验室检查： 外部检查法 摸胎法 阴道检查法：大小鼠、豚鼠、地鼠 直肠检查法：大动物 超声波检查法 孕酮含量测定法 青蛙试验：猴 第五节 分组与编号 动物实验之前，必须对动物进行随机分组，再编号标记。 随机化分组：避免人为影响 一、分组 例1：将14只小鼠随机分成两组。 ①先将小鼠编为1～14号， ②在随机数字表上任点一数，按任意方向连续抄14个随机数字。或者用计算器产生随机数字。 编排如下： 动物编号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 随机数日 16 22 77 94 39 49 54 43 54 82 17 37 93 23 归 组 B B A B A A B A B B A A A A ③奇数代表A织，偶数代表B组 ④A组： 3 5 6 8 11 12 13 14 B组： 1 2 4 7 9 10 ⑤调整分组：接刚才随机数字23继续抄表得随机数字78，用78除以8（因为需要把A组的8个数字调整掉一个），得余数6，所以把A组的第6个动物，即12号动物调整到B组。 ⑥ 最终分组 A组： 3 5 6 8 11 13 14 B组： 1 2 4 7 9 10 12 注意： 如果A组多3个，则再取1个随机数字，除以7。 如果除尽，则写下除数当做余数。 例2：12只大鼠随机分为3组 ①大鼠编号1~12 ②在随机数字表上任点一数，按任意方向连续抄12个随机数字。 ③每个数分别用3除，记录余数（整除记下3） ④ 根据余数分组 大鼠编号：1， 2， 3， 4， 5， 6， 7， 8， 9， 10， 11， 12 随机数字：08，27，01，50，15，29，39，39，43，79， 69，10 余数： 2， 3， 1， 2， 3， 2， 3， 3， 1， 1， 3， 1 组别： B， C， A， B， C， B， C， C， A， A，C， A