12 第十二章 动物染色体工程与转基因动物.pptx

第十二章 动物染色体工程与转基因动物;动物染色体工程;第一节 多倍体动物;Triploid Grass Carp三倍体草鱼;一 多倍体动物培育;（一）物理方法;（二）化学方法;（三）生物学方法;二 多倍体动物鉴定;第二节 转基因动物;一 转基因方法;（二）胚胎干细胞方法 胚胎干细胞（ES）是一种含正常二倍染色体的具有发育全能性的细胞，因此只要将外源DNA导入胚胎干细胞就可以实现基因的转移。可以通过核移植、聚合、注射法产生转基因动物。;（三）精子载体法 精子载体法是一种直接用精子作为外源DNA载体的转移方法。基本方法是：精子直接与外源DNA混合培养，外源基因可以进入精子头部，受精后就克发育成转基因动物。 与显微注射技术相比，具有简单、广泛适用的特点;（四）逆转录病毒感染法 将目的基因重组到逆转录病毒载体上，人为感染着床前或着床后的胚胎，或直接将胚胎与能释放逆转录病毒的细胞共孵育达到感染目的，通过病毒将外源目的基因插入整合到宿主基因DNA中。由于逆转录病毒的高效率感染和在宿主细胞DNA上的高度整合特性，可以提高基因转移效率。;（五）卵细胞显微注射法 由于处于减数分裂中期（MII）的卵细胞无核膜的时间远长于处于有丝分裂的细胞，因此为逆转录病毒载体介导的基因插入提供了更大的可能性。将外源基因克隆至逆转录病毒载体，然后将其显微注射到受精前卵细胞的卵周隙，然后在体外受精，培养至囊胚期，移入假孕的雌性动物子宫内发育。;二 转基因动物的鉴定;（二）聚合酶链式反应（PCR）技术 针对目的基因设计特异性引物，以组织提取的DNA为模板进行PCR扩增，通过对扩增产物进行序列分析就可以实现转基因动物的鉴定。但是PCR方法有时会存在假阳性。;三 基因改良动物;（一）快速生长和肉质改善 转生长激素基因的猪等动物的生长速度和饲料利用效率显著提高，瘦肉率也有所增加。;（二）增加羊毛产量和性能;四、转基因动物乳腺生物反应器;采用转基因动物生产基因工程药物，最理想的表达场所是乳腺。乳腺是一个外分泌器官，乳汁不进入体内循环，因此不会影响到转基因动物本身的生理代谢。从转基因乳汁中获取目的基因产物，不??产量高、以提取，而且表达的蛋白经过重复呢的修饰加工，具有稳定的生物活性。利用转基因技术在哺乳动物特异组织系统内生产人类药用蛋白是当今生物制药的研究热点之一，利用动物乳腺生物反应器生产生物活性蛋白将有望发展为一个新兴的产业。;建立转基因动物乳腺生物反应器的大致流程：①构建相应的乳腺表达载体，分离人类药用蛋白的编码基因，将乳蛋白基因的启动子与外源基因连接，再与乳腺特异性表达调节元件相连接形成乳腺细胞表达载体②通过转基因技术得到转基因动物③在泌乳期选择动物乳汁中表达有药物蛋白的个体