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作业测评·固效果
1.[2014·潍坊联考]为提高我国稻米的含铁量,通过农杆菌介导将菜豆的铁结合蛋白基因导入了一个高产粳稻品种中。获得了高含铁量转基因水稻株系,下图为培育过程。请分析并回答问题:
(1)获取重组载体用到的“手术刀”是________。过程用________法将重组载体导入愈伤组织细胞。
(2)重组载体中的标记基因的作用是________________。检测目的基因是否转录,需用________________作探针。
(3)图中过程须在________条件下进行,培养基中除加入营养物质外,还需添加植物激素,作用是________________。
(4)过程除了用秋水仙素或低温诱导来处理,还可以采用________技术,该技术常用的诱导剂是________。
解析:将目的基因导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法,检测目的基因的转录,常用分子杂交的方法,基因探针就是用同位素标记的目的基因,该题的目的基因是铁结合蛋白基因。过程是植物组织培养须在无菌条件下进行,培养基中的植物激素主要是生长素和细胞分裂素,主要用于促进细胞的生长和分化,通过植物体细胞杂交技术可以培育多倍体,常用聚乙二醇作诱导剂,也可以用离心、振动、电刺激等物理手段诱导。
答案:(1)限制性核酸内切酶 农杆菌转化
(2)检测目的基因是否导入受体细胞 同位素标记的铁结合蛋白基因
(3)无菌 促进细胞分裂、生长、分化
(4)植物体细胞杂交 聚乙二醇
2.下图是利用基因工程方法培育抗虫棉的过程。请回答相关问题:
(1)从苏云金芽孢杆菌的DNA上获取抗虫基因,需要用到的工具是________,此工具主要是从________生物中分离纯化出来的,它能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个脱氧核苷酸之间的________键断开。
(2)构建重组质粒时,常用Ti质粒作为载体,是因为Ti质粒上具有________,它能把目的基因整合到受体细胞________。
(3)E过程是利用________技术完成的,要确定抗虫基因导入棉花细胞后,是否赋予了棉花抗虫特性,在个体水平上还需要做________实验。
(4)将目的基因导入植物细胞,除采用上图中的方法外,还可采用________法和花粉管通道法。
解析:(1)限制酶用于切割DNA分子,获取目的基因。限制酶主要从原核生物细胞中获取。限制酶可断开磷酸二酯键,将DNA分子切开。(2) Ti质粒可将T-DNA片段整合到植物细胞的染色体DNA上,故将目的基因借助Ti质粒导入植物细胞中。(3)E过程利用了植物组织培养技术。可把害虫接种到转基因植株上,以检测转基因植株的抗虫基因是否正常表达。
答案:(1)限制酶 原核 磷酸二酯
(2)T-DNA片段 染色体DNA上
(3)植物组织培养 抗虫的接种
(4)基因枪
3.转基因生物可作为生物反应器,用来生产人们所需的药用蛋白,如激素、抗体、疫苗、酶等,甲图是通过生物工程培育能产生人胰岛素的烟草的过程。
(1)构建表达载体的A过程中,可选用不同限制酶,如乙图所示过程,采用EcoR I和EcoR V酶切含有目的基因的DNA和质粒,这样可以防止酶切产物在加入DNA连接酶后,出现_______________;若在图中只使用一种DNA连接酶,应选用________(填“E·coliDNA连接酶”或“T4 DNA连接酶”)。
(2)D过程采用的方法是________,如受体细胞是单子叶植物体细胞一般不采用该方法,原因是________________________________________________________________________________________;
E过程体现的生物学原理是____________________。
(3)如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测,F过程应该用____________________作为探针。
解析:(1)用不同的限制性核酸内切酶切割质粒和目的基因,形成的黏性末端不同,再用DNA连接酶连接,可以防止质粒和含目的基因的外源DNA自身环化。若在图中只使用一种DNA连接酶,应选用T4DNA连接酶,因为T4DNA连接酶既可以连接黏性末端,也可以连接平末端。(2)图中目的基因导入植物细胞用的是农杆菌转化法。受体细胞若是单子叶植物体细胞一般不采用农杆菌转化法,因为大多数农杆菌对单子叶植物没有感染能力。植物组织培养的理论基础是细胞的全能性。(3)检测目的基因是否导入受体细胞时,应用放射性同位素标记的人胰岛素基因作探针。
答案:(1)质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化 T4DNA连接酶 (2)农杆菌转化法 单子叶植物伤口处细胞不分泌酚类物质,不能吸引农杆菌移向这些细胞(或大多数农杆菌对单子叶植
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