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- 约 62页
- 2016-06-21 发布于湖北
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生物制片技术——石蜡切片和H-E染色 【目的要求】 通过制作动物石蜡切片和苏木精-伊红染色,了解石蜡切片制作和染色的基本原理和一般方法。 【基本原理】——生物制片 涂片法/滴片法 压片法 装片法/撕片法 磨片法 徒手切片法 切片法 石蜡 冰冻 火棉胶 切片法概述 先用某些特殊物质渗入组织块的内部起支持作用,并将整个组织块包住,再用精密的切片机制作切片,这种方法称为包埋法。 常用的包埋剂有石蜡、火棉胶、炭蜡、明胶、水和塑料等。根据包埋剂的不同,分别有石蜡切片、火棉胶切片、冰冻切片等,它们各有长处,但是使用得最多的还是石蜡切片技术。 优点:石蜡能切出极薄的蜡片(2~10μm);切片时能连成蜡带,便于制作连续切片;操作较容易,组织块可以包埋在石蜡中长期保存。 缺点:制作过程较长,步骤很多,一步不慎往往导致前功尽弃;处理会引起组织块或多或少地收缩;切片时受湿度影响比较大。 【实验用品】 1、器材:手术器械、双面刀片、青霉素玻璃小瓶、烘箱、酒精灯、塑料面盆、单面刀片、蜡铲、台木、切片机、切片刀、毛笔、蜡带盘、水浴锅、染色缸、载玻片、显微镜等。 2、试剂的配制 :固定液、酒精、二甲苯、石蜡、蛋清、甘油、苏木色精、氨水、盐酸、伊红、中性树胶。 【基本步骤】 1、取材 2、固定 3、漂洗 4、脱水 5、透明 6、透蜡 7、包埋 8、修块 9、切片 10、贴片 1. 取材 材料新鲜,操作迅速。 刀
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