天然产物提取工艺学本剖析.docVIP

《天然产物提取工艺学》实验指导书 烟台南山学院 工学院食品科学与工程系 二○一四年十二月 前 言 1、实验前必须认真预习实验指导书及实验内容，明确实验目的、步骤、原理、回答实验教师的提问，回答不合要求者，须重新预习，才能进行实验。 2、对规定实验外确属需要的内容，可先提出实验原理和方法，经指导教师同意后，方可进行实验。 3、做实验时必须严格遵守实验室的规章制度和仪器设备的操作规程，服从指导教师的指导。 4、爱护仪器设备，节约使用材料，使用前详细检查，使用后要整理就位，发现丢失或损坏应立即报告，未经许可不得动用与本实验无关的仪器设备及其它物品，不准将任何实验室物品带出室外。 5、实验时必须注意安全，防止人身和设备事故的发生，若发生事故应立即切断电源，及时向指导教师报告，并保持现场，不得自行处理，待指导教师查明原因并排除故障后，方可继续实验。 6、进入实验室后应保持安静，不得高声喧哗和打闹，不准随地吐痰，不准乱抛纸屑杂物，要保持实验室和仪器设备的整齐清洁。 7、实验完毕后，经指导教师检查仪器设备、工具、材料及实验记录后方可离开。 8、实验后要认真完成实验报告，包括分析结果、处理数据、绘制曲线及图表等。对不合格要求的实验报告应退回重做。 9、对违反实验规章制度和操作规程、擅自动用与本实验无关的仅器设备、私自拆卸仪器而造成事故和损失的肇事者必须写出书面检查，视情节轻重和认识程度按规定处理。  目 录 实验一 薄层层析法分离氨基酸 1 实验二 葡萄皮色素提取及稳定性探究 4 实验三 青霉素的萃取与萃取率的计算 6 实验四 淀粉的提取及性质分析 9 实验一 薄层层析法分离氨基酸 实验类型：验证性实验 实验学时：4 实验要求： 必修 适用专业：食品生物技术 一、实验目的 1、通过氨基酸的分离，学习并掌握薄层层析的原理和操作技术； 2、掌握氨基酸的鉴定方法。 二、实验内容 1、制板 2、点样 3、层析 4、显色 三、仪器设备 仪器：毛细管、电热吹风机、层析缸、小型玻璃喷雾器、层析板、铅笔、直尺、分析天平、量筒、烧杯、烘箱。 四、所需耗材 1、实验材料：谷氨酸、组氨酸、脯氨酸标准品 2、试剂： （1） 氨基酸标准溶液：0.01mol/L脯氨酸、谷氨酸、组氨酸标准溶液及混合溶液。 （2）硅胶G （3）0.5%羧甲基纤维素钠（CMCNa）：取羧甲基纤维素钠5g溶于1000ml蒸馏水中，煮沸，静置冷却，弃沉淀，取上清备用。 （4）展开溶剂：按80:10:10比例（V/V）混合正丁醇、冰醋酸及蒸馏水，临用前配制。 （5）0.25%的水合茚三酮溶液：称取0.25g茚三酮，加100mL蒸馏水溶 解，避光保存。 （6）展层-显色剂：按照10:1比例（V/V）混匀展开剂和0.25%茚三酮溶液 （二）操作步骤 1、制板 （1）调浆：称取硅胶3g，加0.5%的羧甲基纤维素钠8ml，调成均匀的糊状。 （2）涂布：取洁净的干燥玻璃板a均匀涂层b。 （3）干燥：将玻璃板水平放置，室温下放置0.5h，自然晾干。 （4）活化：70℃烘干60分钟。 2、点样 （1）标记：用铅笔距底边2cm水平线上均匀确定4个点并做好标记。每个样品间相距1cm。 （2）点样：用毛细管分别吸取氨基酸标准品及混合氨基酸溶液，轻轻接触薄层表面点样。加样原点扩散直径不超过2mm。点样后用电吹风轻轻吹干，必要时重复加样。 3、层析 将薄层板点样端浸入展层-显色剂，展层-显色剂液面应低于点样线。盖好层析缸盖，上行展层。当展层剂前沿离薄板顶端2cm时，停止展层，取出薄板，用铅笔描出溶剂前沿界线。 4、显色 在90℃下烘干30min，即可显出各层斑点。 1、记录各氨基酸色斑中心至样品原点中心距离（a）及溶剂前缘至样品原点中心距离（b） 2、计算各种已知氨基酸和未知氨基酸色谱的Rf值： 3、分析混合样品中未知氨基酸的组分。、pH、H2O2对葡萄95%无水乙醇、酒石酸、盐酸、丙酮、H2O2溶液 大吸收波长在530nm葡萄皮色素浸提流程:葡萄皮→干燥→破碎（5g）→提取剂浸提(50mL乙醇在80℃水浴中浸提1小时) 1、pH对色素颜色的影响 葡萄色素在不同的pH值范围内有不同的颜色，分别观察pH为3、6、10时葡萄色素的颜色。 2、温度对色素的影响 将葡萄皮色素溶液在不同温度下（30、40、50℃）保温30min,冷却后观察其颜色的变化，并测定色素溶液的吸光度值。 3、过氧化氢对色素的影响。 向葡萄皮色素溶液中加入不同浓度的H2O2,（0.02、0.06、0.1%）放置30min后，测定色素的吸光值，并观察颜色的变化。 150ml棕色瓶（2个）、分液漏斗、100ml量筒、100ml烧杯（2个）、玻璃棒、酸式滴