天然药物化学1剖析.ppt

3、简单吸附法，进行物质的浓缩和精制 一般有两种方式： （1）除杂质，如脱色，采用活性炭进行脱色，结晶。但有些色素活性炭也不行。 （2）浓缩，对提取液体积过大，浓度低时，此时可采用在溶剂中加入吸附剂，吸附有效成份，然后，用溶剂洗脱，达到浓缩目的。 4、吸附柱层析用于物质分离有关注意事项； （1）用量，一般吸附剂用量为样品的30—100倍，对成份复杂，极性相近的难于分离者，吸附剂用量可增加至于100—200倍。 （2）装柱（干法和湿法），硅胶，Al2O3极性吸附剂，在极性溶剂中吸附力弱，在湿法装柱时，应选择极性小的溶剂装柱。 （3）洗脱，实际中，多采用梯度洗脱，即先用低极性溶剂洗，逐渐增加洗脱剂极性，以加强洗脱能力。（注意：不能先用极性大的溶剂）。 （4）避免化学吸附 酸性成份宜用硅胶，碱性成份宜用氧化铝，否则产生死吸附，必要时，洗脱剂中可加入适量的酸或碱，（如醋酸，氨，吡啶等），根据实际上情况而定。 （5）溶剂系统 在柱层析前，要先通过薄层析（TLC）摸索，以寻找最佳洗脱系统。 5、聚酰胺吸附层析法 属氢键吸附，应用也比较广泛，主要用于分离酚类化合物，特别对分离黄酮类，醌类应用最多。 （1）性质和原理 聚酰胺属高分子，其组成是由己二酸和己二胺通过酰胺键连接而成的大分子化合物，分子中即有＝C＝O，又有NH2即可与同分子形成氢键，又能与其它分子形成氢键，如：C=O可与酚—OH，—NH—与=C=O通过氢键吸附，与不含酚－OH的成份分离。属半化学吸附。 特点： 吸附容量大，范围广，凡能与=C=O，—NH—形成氢键的成份都可用于分离，一般说，吸附能力与形成氢键有如下关系： 1、形成氢键的基团越多，吸附力越强。 ? 2.与形成氢键的基团的位置有关： ?  ? 原因是分于内形成氢键，减弱了对聚酰胺的吸附，故易于洗脱。 3、芳香化程度越高，吸附力越强（共轭程度）。 ?  ＞ ＞ ? ? ? 以上是化合物本身对吸附作用的影响，那么，在聚酰胺层析中，还有另一重因素，即溶剂通过与溶质争夺吸附剂表面，从而改变了成份对聚酰胺的吸附，有下列几个途径； （1）溶剂通过与溶质形成氢键而将溶质从聚酰胺表面上拉下来，解吸附。 （2）溶剂与溶质争夺聚酰胺表面，而将溶质置换下来，解吸附。 因此，溶剂无论与溶质，还是与聚酰胺形成氢键越强，其洗脱能力就越强。不同溶剂对聚酰胺层析中洗脱能力如下： 水＜甲醇＜乙醇＜丙酮＜稀碱＜二甲基甲酰胺＜尿素水溶液 洗脱力增强 吸附力增强 （3）应用；主要用于酚类，黄酮类，其它类也有应用，但相对少些。 （四）根据分子量大小差别进行分离（疑胶过滤法、凝胶渗透层析，分子筛过滤，排阻层折） 天然产物分子大小各异，几十—几百，因此，可根据分子量大小进行分离，常用的方法有透析注，凝胶过滤法，超滤法，超速离心法，以上几种方法中，凝胶过滤法应用最多，下面着重介绍一下凝胶过滤法。 1、原理 根据分子量大小差别进行分离，其过程是利用分子大小不同，象过筛一样，将大小不同的分子分开，故称分子筛，该法所用的载体种类较多，常用的有葡聚糖凝胶（Sephadex G）及羟丙基葡聚糖凝胶（Sephadex LH—20）。 以葡聚糖凝胶为例，说明其过程， 葡聚糖凝胶在水中不溶，但可以溶涨，形成球状颗粒，具有网状结构，即颗粒内有孔，装入柱后，于上部加入样品，当用洗脱剂进行洗脱时，如图； 葡聚糖凝胶；是由葡聚糖（右旋糖酐）和甘油通过醚键相交联而成的网状结构。教材中介绍了几种凝胶，葡聚糖凝胶和羟丙基葡聚糖凝胶（Sephadex-LH-20）自己看 Sephadex LH-20是由sephadex-G25经羟丙基处理后的产物。 （五）利用物质解离程度不同进行分离（离子交换树脂法） 具有酸碱性的成份，在水中可呈解离状态，或调整PH使其解离，可以通过电泳和离子交换树脂法进行分离，常用离子交换树脂法。本章主要介绍： 1、原理 根据物质的解离度不同进行分离，以离子交换树脂为固定相，以水或与水混溶的溶剂作流动相，具有酸碱性的成份，在水中可呈离子状态或调整PH使其解离，当流动相通过树脂时，溶液中呈离子状态的组份被树脂吸附，交换，而呈分子状态的组份不被树脂交换而流出，达到分离目的。主要有以下几点： 1、特点： （1）选择性，亲合力大小不同而分离。 （2）解离度差别进行分离，控制流动相的PH，可使不同组份以离子或游离形式出现—分离。 （3）形成络离子后，再进行离子交换。如糖类为中性分子，不发生