高中生物竞赛复习课件—第二章 核酸化学2.pptVIP

第五节 核酸的某些理化性质及 核酸研究常用技术 核酸具有酸性；粘度大；由于嘌呤碱和嘧啶碱有共轭双键，能吸收紫外光，最大吸收峰为260nm。 故常用紫外分光光度法测定核酸的含量。 二、DNA的变性 在理化因素作用下，DNA双螺旋的两条互补链松散而分开成为单链，从而导致DNA的理化性质及生物学性质发生改变，这种现象称为DNA的变性(denaturation)。 引起DNA变性的因素主要有：①高温，②强酸强碱，③有机溶剂等。 DNA的变性过程 ① 增色效应(hyperchromic effect)：指DNA变性后对260nm紫外光的光吸收度增加的现象； ②粘度降低 ③ 生物学功能丧失或改变。 DNA的紫外吸收光谱 加热DNA溶液，使其对260nm紫外光的吸收度突然增加，达到其最大值一半时的温度，就是DNA的变性温度（融解温度，melting temperature, Tm）。 Tm的高低与DNA分子中G+C的含量有关，G+C的含量越高，则Tm越高。 核酸的变性、复性和杂交 三、DNA的复性与分子杂交 将热变性后的DNA溶液缓慢冷却，在低于变性温度约25～30℃的条件下保温一段时间（退火annealing），则变性的两条单链DNA可以重新互补而形成原来的双螺旋结构并恢复原有的性质。 将变性DNA经退火处理，使其重新形成双螺旋结构的过程，称为DNA的复性。