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直接凝集试验 荚膜肿胀试验 血清学诊断 已知抗原检测血清中相应抗体 取患者急性期和恢复期双份血清,后者的抗体效价比前者升高4倍或4倍以上才有诊断意义。 THE END 谢谢大家! 第六章 动物实验与血清学试验 主要内容 实验动物的抓取方法 1 2 3 4 5 实验动物的处死方法 实验动物各种体液的采集方法 实验动物血液的采集方法 实验动物的麻醉方法 进行实验操作前必须注意的事情 1. 实验动物作为人类的替难者进行各种生物医学研究。试验中要从动物福利和动物实验伦理学考虑,减少一些不必要的动物实验,如若不得不做的动物实验,要尽可能将动物的痛苦、压迫和不适降到最低。 2. 动物实验的实践性非常强,不能仅靠书本理论知识,需要通过反复实践加以掌握,以保证实验的顺利进行和减少动物承受的痛苦 国际上对动物实验伦理有如下五项要求: ⑴动物居住空间应符合标准,注意日常的饲育管理,不使动物饥饿、缺水和患病。 ⑵尽可能地采用代替法最少地使用和牺牲动物。 ⑶使用犬、猫和猴时,实验前应进行训练,尽可能地减少动物的恐惧和不安。 ⑷实验结束和动物不可能恢复时,应采取安乐死。 ⑸要爱护试验动物和对由于实验死亡的动物应持有怜悯和感谢之情。 一、动物的抓取 动物的抓取 小白鼠的捉持 捉拿时可先用右手抓住并提起鼠尾,置于实验台或鼠笼上,并稍向后拉;用左手的拇指和食指抓住小鼠两耳后颈背部的皮肤,将鼠置于左手心中,拉直后肢,以无名指及小指按住鼠尾或小鼠的左后肢即可。 小鼠抓取方法 大白鼠的捉持 大白鼠的捉拿时,可戴上手套。实验者可用右手捉住鼠尾,放在实验台或鼠笼上,并稍向后拉;左手掌面向鼠背,食指和中指压住鼠的头顶,拇指和无名指分别从鼠的两腋下插入,将鼠的两前肢卡住;或拽紧鼠后颈及后背皮肤即可。 大鼠抓取方法 动物的抓取 豚鼠的捉拿、固定? 豚鼠胆小易惊,抓取时必须稳、准、迅速。 先用手掌扣住鼠背,抓住其肩胛上方,将手张开,用手指环握颈部,另一只手托住其臀部,即可轻轻提起、固定。 豚鼠抓取方法 动物的抓取 家兔的捉持 用一手抓住家兔颈背部皮肤,将兔提起,另一手托其臀部,使兔呈坐位姿势。 犬抓取注意点 不要轻易使用长柄铁钳,钳伤造成的伤害会使它对你更加恐惧,影响以后实验的进行。 抓取后用绳子将嘴绑住。 狗嘴的捆绑方法 家兔的抓取 动物的抓取 二、实验动物的麻醉方法 实验动物的麻醉方法 对实验动物进行麻醉的目的是:消除实验过程中引起的痛苦和不适,确保实验动物的安全和动物实验的顺利进行,是动物实验伦理的一个重要方面。 应结合实验目的、实验动物种类、日龄及健康状况等因素进行综合考虑,决定选用的麻醉剂和麻醉方法。 麻醉方法有全身麻醉和局部麻醉两种。在实验动物的麻醉中绝大多数采用全身麻醉。 吸入麻醉法:用挥发性麻醉药。 常用麻醉药: 乙醚 氯仿 全身麻醉 注射麻醉法:用非挥发性麻醉药。 常用麻醉药: 戊巴比妥钠 硫喷妥钠 氯氨酮 乌拉坦 实验动物的麻醉方法 常用非挥发性麻醉药的剂量 药物及常用的溶液浓度 剂量(mg/kg) 麻醉持续时间与特点 小鼠 大鼠 豚鼠 家兔 乌拉坦 (20~25%) 1000~1500(ip) 1000~1500(ip) 1000~1500(ip) 1000~1200(iv) 2~4小时。 对呼吸和神经影响小,但可降低血压 1000~1500(ip) 戊巴比妥钠 (1~4%) 45~50(ip) 40~50(ip) 40~50(ip) 30~40(ip) 2~4小时。 注射后作用迅速,一般最常用,肌松不够完全。 20~25(iv) 硫喷妥钠 (2~4%) 30~40(iv) 约半小时。 实验动物的麻醉方法 实验动物麻醉应注意的事项 麻醉之前应禁食,准确称量动物体重,作为计算麻醉剂用量的依据。 应注意不同麻醉药对动物的作用是不同的,如戊巴比妥钠、硫贲妥钠等能抑制心肌收缩力,使肌肉松弛,而氯胺酮则相反。 大动物犬、猴、羊等麻醉前半小时应注射麻醉前给药如阿托品和苯巴比妥钠。 静脉注射麻醉药是必须缓慢,边注射边观察动物。 在麻醉过程中密切观察动物的反应,动物在麻醉期间体温下降,应注意保温。 实验动物的麻醉方法 三、实验动物血液的采集方法 实验动物血液的采集方法 1、大鼠、小鼠的采血方法 尾部采血 眼眶后静脉丛采血 颈(股)静脉或颈(股)动脉采血 摘眼球采血 断头采血 心脏采血 尾部采血 心脏采血 大小鼠不同采血方法的比较 采血方法 采血量(ml) 应 用 小鼠 大鼠 断头采血法 0.2-1.0 1.
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