1固相萃取-气相色谱-质谱联用分析油脂中2-十二烷基环丁酮和2-十四烷基环丁酮.docVIP

固相萃取-气相色谱-质谱联用法检测植物油中2-十二烷基环丁酮和2-十四烷基环丁酮 李文斌，顾春艳，张亚杰，晋立川，蒋勇，陈治春，谢巧金 （迪马公司 天津 300402 li_wenbin@） 关键词：固相萃取气相色谱-质谱2-十二烷基环丁酮2-十四烷基环丁酮植物油经辐照后，在含脂食品中会产生特异性辐解产物2-烷基环丁酮(2-Alkylcyclobutanones ，2-ACBs)，它是含脂辐照食品的特异性辐解产物，在未辐照的含脂食品中，至今还从未检测到此类化合物[-2]。在1990年2-ACBs 类化合物可作为检测含脂辐照食品的标志性化合物, 首次被报道[]，随后欧盟标准EN1785[]和GB\T 21926-2008 [5]。2-十二烷基环丁酮2-dodecylcyclobutanone，2-DCB）和2-十四烷基环丁酮2-tetradecylcyclobutanone，2-TCB）相对于其它2-ACBs较为稳定，因此一般作为检测含脂辐照食品的主要标志性化合物[6-7]。目前对含脂辐照食品大多采用佛罗里硅土柱进行净化[4-5]，但是该法的应用范围有限。本实验拟通过优化固相萃取（solid phase extraction，SPE）条件，为进一步缩短2-ACBs 萃取和分离时间、减少溶剂使用量、提高检测灵敏度以及扩大方法应用范围提供基础数据和理论依据。气相色谱条件：色谱柱为DM-5MS (30.0m×250μm，0.25μm)；载气He(99.995%)；恒流，柱流速1.0mL/min；不分流，进样量1μL，进样口温度为260℃；起始温度80℃(保持1min)，以15℃/min的速度升至150℃，再以8℃/min升温至200℃，再以20℃/min升温至260℃(保持5min)。 质谱条件：EI源，离子源200℃，溶剂延迟为3min，选择离子监测模式（SIM），选择监测离子（m/z）：69、84、98、112、125。 称取0.5 g样品于10 mL带塞试管中，加入5 mL乙腈，涡旋混合2 min，超声提取2 min，4000 rpm下离心2 min，取上清液；下层油脂再用5 mL乙腈重复上述步骤，合并两次上清液。将得到的上清液在50℃下，氮吹近干，再慢慢挥干，再向氮吹瓶中加入2.5 mL正己烷复溶，待净化。 依次用5 mL甲基叔丁基醚，5 mL正己烷缓慢通过ProElut Silica固相萃取柱；再将1.2节方法制得的待净化液转移到ProElut Silica固相萃取柱中，流出液弃去；然后用5 mL正己烷淋洗，弃去流出液；再用10 mL甲基叔丁基醚：正己烷(1：99 V:V)洗脱，用旋转蒸发瓶接收，直至洗脱液完全自然滴出。在50 ℃下，将收集到的洗脱液氮吹浓缩，然后用正己烷定容至1 mL后供GC-MS分析。在固相萃取操作中，影响分析物峰面积的主要固相萃取因素有洗脱剂、洗脱体积、洗脱速率和上样速率[]。为了获得最佳分析结果，需要对其进行优化。 对于油脂类样品，采用固相萃取柱进行样品是必不可少的步骤。结合相应参考文献，本实验采用了硅胶、PSA、Florisil、Alumina填料的固相萃取柱，结果表明对于植物油，硅胶柱相对于其他填料的固相萃取柱来说，2-DCB 和2-TCB回收率较高，添加回收率达到了80%-120%，满足的要求[]，且达到很好的净化效果。固相萃取技术最重要的目的在于通过固相萃取柱将目标化合物与主要干扰物分开，从而实现净化的目的。在此过程中应非常注意选择合适的洗脱溶剂。样品处理过程是先用正己烷将其中的中性化合物除去，参照Horvarovich 等[]报道，用硅胶柱分离样品中的2-DCB和2-TCB，选用弱极性的甲基叔丁基醚/正己烷（V/V）混合溶剂将稍强极性的2-DCB 和2-TCB洗脱下来。由于样品基质与文献不一样，淋洗液与洗脱液的选择也会不一样。因次需要考察正己烷以及其与甲基叔丁基醚不同比列的混合液作为洗脱液时2-DCB和2-TCB的回收率。ProElut Silica固相萃取柱甲基叔丁基醚：正己烷作为洗脱液当甲基叔丁基醚浓度低于1%（V/V）时，2-DCB和2-TCB没有被完全洗脱下来；而当甲基叔丁基醚浓度高于1%（V/V）时，悬蒸瓶中出现，且随浓度增加，出油的现象更加严重，从而2-DCB和2-TCB。因此本实验采用正己烷作为淋洗液，甲基叔丁基醚：正己烷(1：99 V:V)作为洗脱液。 用2-DCB和2-TCB标准中间液配制质量浓度系列为0.01μg/mL、0.02μg/mL、0.05μg/mL、0.1μg/mL、0.2μg/mL、0.5μg/mL的标准工作溶液，进样后以峰面积为纵坐标，以2-DCB和2-TCB的质量浓度为横坐标，绘制标准曲线，计算相关系数。方法在0.01～0.5μg/mL范围内方法线性良好