07-1-色谱法原理和基础.pptVIP

Chromatography 中南民族大学 2011.秋 色谱法 内容 原理和基础 气相色谱 2 1 液相色谱 3 简介 第一节 一、色谱法的发展史 最早创立色谱法的是俄国植物学家Tswett 1906年他为了分离植物色素，将植物绿叶的石油醚提取液倒入装有碳酸钙粉末的玻璃管中，并用石油醚自上而下淋洗，由于不同的色素在碳酸钙颗粒表面的吸附力不同，随着淋洗的进行，不同色素向下移动的速度不同，形成一圈圈不同颜色的色带，使各色素成分得到了分离。他将这种分离方法命名为色谱法（chromatography）。 一、色谱法的发展史 在Tswett提出色谱概念后的20多年里没有人关注这一伟大的发明。直到1931年德国的Kuhn和Lederer才重复了Tswett的某些实验，用氧化铝和碳酸钙分离了α-，β-，和γ-胡萝卜素，此后用这种方法分离了60多种这类色素。 Martin和Synge在 1940年提出液液分配色谱法（Liquid－Liquid Partition Chromatography），即固定相是吸附在硅胶上的水，流动相是某种有机溶剂。1941年Martin和Syngee提出用气体代替液体作流动相的可能性，11年之后James和Martin发表了从理论到实践比较完整的气液色谱方法（Gas－Liquid Chromatography），因而获得了1952年的诺贝尔化学奖。 1957年Golay开创了开管柱气相色谱法（Open－Tubular Column Chromatography） 1956年Van Deemter等在前人研究的基础上发展了描述色谱过程的速率理论 一、色谱法的发展史 1944年Consden等就发展了纸色谱，1949年Macllean等在氧化铝中加入淀粉粘合剂制作薄层板使薄层色谱法（TLC ）得以实际应用； 60年代末把高压泵和化学键合固定相用于液相色谱，出现了高效液相色谱（HPLC）； 80年代初毛细管超临界流体色谱（SFC）得到发展，但在90年代后未得到较广泛的应用； 在80年代初由Jorgenson等集前人经验而发展起来的毛细管电泳(CE)，在90年代得到广泛的发展和应用。同时集HPLC和CZE优点的毛细管电色谱在90年代后期受到重视。 色谱法起过关键作用的诺贝尔奖研究工作 年代 获奖学科 获奖研究工作 1937 化学 类胡萝卜素化学，维生素A和B 1938 化学 类胡萝卜素化学 1939 化学 聚甲烯和高萜烯化学 1950 生理学、医学 性激素化学及其分离、肾皮素化学及其分离 1951 化学 超铀元素的发现 1955 化学 脑下腺激素的研究和第一次合成聚肽激素 1958 化学 胰岛素的结构 1961 化学 光合作用时发生的化学反应的确认 1970 生理学、医学 关于神经元触处迁移物质的研究 1970 化学 糖核苷酸的发现及其在生物合成碳水化合物中的作用 1972 化学 核糖核酸化学酶结构的研究 1972 生理学、医学 抗体结构的研究 色谱法在分析化学中的地位和作用  年代 1945 1955 1965 1975 1985 1995 仪器分析方法 光谱法 14.3 26.3 28.7 29.7 30.0 30 色谱法 1.4 2.3 12.0 26.7 35.0 36 电化学法 4.4 6.2 10.2 13.5 15.0 16 放射分析法 1.0 2.0 6.5 13.8 17.0 18 经典分析法 比色法 23.0 20.0 15.2 9.2 2  滴定法 25.6 22.0 12.6 5.1 1 重量法 8.5 6.5 3.6 2.0 ？ 不同年代各种分析方法所占的比例 二、色谱法的特点 色谱法是以其高超的分离能力为特点，它的分离效率远远高于其它分离技术如蒸馏、萃取、离心等方法。 优点 分离效率高：可以分离复杂混合物，有机同系物、异构体、手性异构体。 灵敏度高：可以检测出μg.g-1(10-6)级甚至ng.g-1(10-9)级的物质量。 分析速度快：一般在几分钟或几十分钟内可以完成一个试样的分析。 应用范围广： 气相色谱：沸点低于400℃的各种有机或无机试样的分析。 液相色谱：高沸点、热不稳定、生物试样的分离分析。 不足之处： 被分离组分的定性较为困难。  三、色谱法的分类 三、色谱法分类 按流动相和固定相的状态分类 三、色谱法分类 按分离机理分类 吸附色谱法：吸附能力强弱 分配色谱法：溶解度不同 离子交换色谱法：离子交换剂（固定相）上的亲和力大小不同 尺寸排阻色谱法：多孔固定相中的选择渗透 亲和色谱法：与固定相（固定化分子）的高专属性亲和力 三、色谱法分类 按固定相的外形分类 柱色谱：固定相装于柱内 平板色谱：固定相呈平板状 薄层色谱 纸色谱 色谱流出曲线及术语 第二节 色谱的信号和曲线