08 核移植技术与动物克隆.pptVIP

重构胚体外发育图 人类体细胞核移植技术 历史回顾 2001年，美、意科学家联手展开克隆人的工作。 2001年11月美科学家宣布首次克隆成功了处于早期阶段的人类胚胎，称其目的是为病人“定制”出不会诱发排异反应的人体组织器官，用于移植。 2004年2月11日，美国 《科学》 杂志宣布， 汉城国立大学研究小组成功克隆出人类早期胚胎，并从中提取出胚胎干细胞。 由于法律的限制，人的克隆仅限于治疗性克隆。 治疗性克隆 技术途径包括以下几个步骤： 首先取病人体细胞核，移植到去核的成熟受体卵母细胞； 在早期胚胎形成后，从中分离获得人ES细胞； 对ES细胞进行基因修饰和定向分化研究； 将定向分化后的细胞移植给病人。 治疗性克隆流程图 生殖性克隆流程图 人类体细胞核移植存在的问题 在人类，由于伦理等原因，卵母细胞的获得比较困难，这就给体细胞核移植技术在人类医疗方面的应用带来很大的限制，限制了核移植技术为人类服务的初衷。 解决办法 异种核移植 将人的体细胞作为核供体，另一种动物的卵母细胞为受体细胞而进行的核移植技术。 人体细胞 动物卵母细胞 去核 异种克隆胚 上海第二医科大学 陈莹博士 2003年，她将一5岁男孩的包皮细胞与已去除细 胞核的新西兰兔卵母细胞融合，获得了人类早期胚胎。 人兔异种核移植的焦点问题 1. 非人类哺乳动物卵母细胞可否对 人体细胞核进行重编程？ 哺乳动物核移植中,无论采用电融合法还是胞质内注射法构建重构卵,都不可避免地会把部分供体线粒体带入受体卵胞质。两种来源的线粒体在重构胚的各阶段发育中到底会有什么样的变化一直是科学家们研究的热点。 2.核移植中线粒体的命运 克隆技术的应用 干细胞生产 复制人体器官，即治疗性克隆 扩大优良畜群、转基因动物的数量 拯救濒危野生动物 为细胞生物学、遗传学等学科提供实验手段和遗传均质的实验动物 ??? 尽管克隆技术有着广泛的应用前景，但离产业化尚有很大距离。因为作为一个新兴的研究领域，克隆技术在理论和技术上都还很不成熟，在理论上，分化的体细胞克隆对遗传物质重编（细胞核内所有或大部分基因关闭，细胞重新恢复全能性的过程）的机理还不清楚 克隆动物是否会记住供体细胞的年龄，克隆动物的连续后代是否会累积突变基因，以及在克隆过程中胞质线粒体所起的遗传作用等问题还没有解决。 克隆技术存在的问题 Your Topic Goes Here Your subtopic goes here Transitional Page Your Topic Goes Here Your subtopic goes here Elements 显微操作仪（micromanipulator） 胚胎细胞核移植 胚胎细胞核移植 (embryo cell unclear transplantation)是指，将一个早期胚胎的细胞核移植到去核的卵母细胞中，构建新合子的生物技术。 胚胎细胞核移植流程图 历史回顾 1938年Spemann提出设想：分化了的细胞核移植能否指导胚胎发育？ 1952年Briggs和King在两栖动物证实了Spemann提出的设想：利用已分化的蛙囊胚细胞核移植到去核的蛙卵母细胞中，得到了重新发育的结果，从而证明了不同时期的胚胎细胞核在相同的卵质中具有重新发育的能力，在特定条件下，可以恢复其发育的全能性。 1981年，瑞士日内瓦大学的伊尔门泽、美国杰克逊实验室，首次对小鼠胚胎细胞进行核移植获得成功。 此后，胚胎细胞的核移植在多种动物上获得了克隆后代，如绵羊(Willadsen等,1986),牛(Prather等,1987),兔(Stice等,1988),猪(Prather等,1989),山羊(张勇等,1991)等。 直到1997年才由 Meng et al成功地克隆出两只猴,这是灵长类动物的首次被克隆。 直至此时,核移植所用的供体细胞均为囊胚阶段以前的胚胎细胞。当时人们普遍认为，早期胚胎尚具有全能性，到囊胚以后则随着分化而逐渐丧失其全能性。 内细胞群 2. 雌原核与雄原核融合 3. 卵裂开始 4. 2细胞期 极体 透明带 极体 卵裂球 受精卵 原核 卵周腔 5. 4细胞期 6. 8细胞期 滋养层 7. 桑椹胚 胚泡腔 8. 囊胚 1. 雌原核与雄原核形成 体细胞核移植技术 动物克隆技术的里程碑 体细胞核移植技术(somatic cell unclear transplantation)是指，将分化程度较高的体细胞移植入去核的卵母细胞中构建新合子的生物技术。 体细胞核移植 历史回顾 1996年，世界第一例从成年动物细胞克隆出的哺乳动物绵羊多莉诞生。这个秘密直到1997年2月才向世人公布。 1997年7月，苏格兰科学家在实验室内