第3章 DNA复制.ppt

* * * 因为所有原核生物和噬菌体的DNA分子只有一个 * * * appearance [E5piErEns] n. 出现, 露面, 外貌, 外观 * 复制子融合 * * * * * Sigama 滚环复制（rolling circle replication）：某些双链环状DNA分子在复制时以某种方式在一条链上切刻，首先从切刻的3’－OH端进行聚合反应，通过链置换作用将切刻5’－P端挤出，当被甩到一定长度后，后随链开始DNA合成，整个过程像一个环在滚动。 由于复制时产生的滚环结构形状象σ，又称σ复制。 病毒、细菌因子 * D 环复制（D－loop复制）：某些双链环状DNA分子以复制叉式进行复制时，一条链先复制，另一条链保持单链状态，整个分子呈D环型，因而叫…。线粒体和叶绿体DNA的复制方式 * * * * * * 大肠杆菌复制起点在起始阶段的结构模型 * 原核生物线性DNA复制的终止机制还不清楚 * The end-replication problem * 生物通报道：上面这幅画是哥伦比亚画家波特罗的作品，叫做《忧郁》，画中的人物十分肥胖，戴着红色的耳环，穿著有蕾丝花边的衣裳，奇怪的是长胡子又有胸毛。今天科学家的研究发现肥胖不仅仅会让你“忧郁”，还会让你的DNA老化。来自伦敦St Thomas医院双子研究单位的负责人Tim Spector研究发现肥胖和吸烟上瘾的病患者的端粒会缩短得比常人快很多。英国诺丁汉大学的Edward Louis补充到：“拥有较短端粒的人的精力远远不如拥有较长端粒的人。” 在正常的人类细胞中端粒会随着DNA复制不断缩短，端粒酶可以防止端粒的缩短，它是端粒复制所必须的一种特殊的DNA聚合酶，具有逆转录酶活性，能以hTR为模板，向染色体末端添加TTAGGG序列。现在癌症研究的一个热点就是发现癌症细胞中端粒酶的活性异常高，推测是这种原因造成了细胞的永生化。 端粒（telomere) 真核生物染色体的两个末端序列，与特定的蛋白质形成复合物。端粒DNA由一段简单的串联重复序列组成，长度可达几百到几千个bp。 端粒酶 一种含RNA的蛋白质复合体，所含RNA链约长150 nt，并约含1～5个拷贝的CyAx重复序列，是合成端粒TxGy股的模板。端粒酶实际是一种逆转录酶，它催化互补于RNA模板的DNA片段的合成。 Mc Clintock(1941)提出 了端粒假说 Elizabeth H. Blackburn等 分离了端粒酶 端粒DNA是真核生物染色体两端简单重复序列，非常保守。端粒酶识别富含G的端粒序列，并将新的重复的端粒序列添加到染色体DNA的3’端。 草履虫 锥虫 端粒的功能 保护染色体末端 防止染色体复制时末端丢失 决定细胞的寿命 固定染色体位置 在人体内端粒酶出现在大多数的胚胎组织、生殖细胞、炎性细胞、更新组织的增生细胞以及肿瘤细胞中。端粒酶的活性在多细胞生物的体细胞中受到抑制，每代子细胞的染色体会逐渐短缩。当端粒长度缩短到一定程度，会使细胞停止分裂，导致衰老与死亡。 端粒酶（telomerase）的结构与功能 端粒酶也称为端聚酶或端粒末端转移酶，由蛋白质和RNA两种成分组成，其中蛋白质具有逆转录酶的活性，其三维结构与其它逆转录酶有明显的相似性，而RNA含有1.5拷贝的端粒DNA重复序列，这一部分序列作为逆转录酶的模板。不同来源的端聚酶在RNA长度上变化很大，但它们都形成特定的二级结构，作为模板的那一部分序列处于单链状态，以方便它与端粒区的重复序列结合，并有效地充当逆转录的模板。 端粒酶活性与细胞分裂能力的关系 端聚酶的结构模型 真核生物染色体 DNA末端补齐模式 ● 端粒DNA (Telomer) TTGGGG(T2G4)序列高度重复的末端 5’ TTGGGGTTGGGGTTGGGGTTGGGG 3’ (富含 G 链) 3’ AACCCC AACCCC AACCCC 5’ (富含 C 链) ● 1985. Carol Greider Blackburn, 1986. Gottchling 尖毛虫 端粒结合蛋白 –1 55kd 端粒结合蛋白 –2 26 kd 四膜虫 端粒酶 （ telomerase ）将T2G4 末端重复延伸 游扑虫 Telomerase = RNA CAAAACCCC 链 + 末端结合蛋白