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罗汉果组培苗生产技术总结 曾令军 广西职业技术学院农业技术工程系 02级应用生物技术专业 学号 摘要：论述罗汉果组培苗生产的技术方法及过程。其中的主要内容包括：①罗汉果的取材处理和灭菌 ②接种与培养 ③继代接种和培养 ④生根 ⑤移栽 ⑥苗期管理。从这六个方面就可以把罗汉果组培苗生产的全过程介绍清楚。并针对在生产过程中遇到的问题提出解决方法。运用该技术方法，可大量快速繁殖罗汉果组培苗，满足生产上大面积种植发展的需要。本文还对罗汉果的发展前景问题谈点个人的看法。 关键词：罗汉果，组培，生产管理 我国罗汉果的栽培历史悠久，近几年来的研究发现罗汉果的利用价值很高，人们越来越看好了罗汉果市场前景，种植规模不断扩大。但传统的罗汉果种植是用种薯种植，种薯种植的缺点是产量低，病毒累积多，品种退化，且种苗不能满足大量种植的需求。近年来人们对罗汉果的良种培育，规范化种植和示范等系列技术进行了比较深入的研究，特别是对优良品种的组培快速繁殖和脱毒取得了很大的进展。组培苗种植有产量高，病害少的巨大优势。以往的种薯种植正逐渐被组培苗所替代。目前很多公司都进行组培苗的工厂化生产。并逐渐完善了生产技术，本人通过参与几个月的罗汉果组培苗生产实习，基本掌握了其从组培到育成商品苗的技术过程。特在此总结归纳如下，有不当的地方，有请各专家给指正。 1　取材处理和灭菌 材料的选择 最好选在天晴的中午或下午取材，避开阴雨天取材可减少污染率。选择粗壮无病毒的幼嫩枝条。 1.2 材料的处理 将罗汉果的茎段先用自来水加些洗衣粉浸泡10min, 浸泡时要充分摇匀，必要时用软毛刷刷洗，然后用自来水冲洗干净。 1.3 灭菌 将洗净的茎段拿到超净工作台上进行消毒处理。把茎段放到一个干净三角瓶中，加入70%的酒精消毒30s，这时也要不停的摇动。将酒精到掉之后，再加灭菌入0.1%升汞消毒5min，这时同样也要不停的摇动，然后用无菌水冲洗5次。 加入70%酒精消毒时，把握好时间，一般在30s，不要延长时间，否则就会烧伤材料，引起褐化。也不要缩短时间，否则就消毒不彻底。消毒完毕后，将材料从三角瓶中取出，放在消毒滤纸上将水分吸干，待接种。 2. 接种与培养 2.1　接种　 　　灭菌的材料剪切成1－2个茎节一段接种入初代培养基中（培养基的配方　略） 培养　 接种好的外植放入培养室中培养，温度26－28℃，光照强度在1500－2000Lx，光照时间每天12小时。正常条件下外植体茎段经一个多月的培养，可长成有几个茎节的无根小苗，可进行增殖继代培养。 3　继代接种和培养 3.1接种 选取生长健壮、无污染、有几个茎节试管苗作继代母种进行接种。 将苗放在无菌铝片上，左手握住镊子将苗镊住，右手握住剪刀，切成带有1～2个腋芽一段，去掉老的茎及叶片，然后把切好的茎段用镊子夹接到继代培养基上。使叶背接触培养基，这是由于叶背气孔多，有利于吸收水分和养分的缘故。 摆放密度要适中，以每个茎段间隔1cm左右为宜，过密则生长不良，过稀则仅浪费培养基而降低增殖率。 3.2　培养 接完种好的瓶苗，培养室培养，培养条件与初代培养的相同，并要观察和记录好苗的生长状况，发现异常情况及时处理。 苗在培养室内培养大约1周左右，基部体积明显膨大呈凹凸不平状，这预示细胞在 进行生长和活跃的分裂。再过3周左右，可以看到从外植体有切口的地方，分化出许多 圆形小突起，长出愈伤组织块，腋芽也开始萌动生长，再经过一段时间（25天左右）， 就生长成有几个茎节的无根植株。又可以进行下一次的继代增殖接种，这样每继代接种 一次，苗就增殖3到4倍。 4. 生根 4.1　生根培养基 配方是1/2MS+NAA0.5。 4.2　生根母种苗的前期培养 罗汉果的生根接种前，要提前对用来生根的苗强光培养，提高光照的目的是为了增 强植物光合作用，使苗变得木质化和绿化，以利于生根，以保证苗的质量。 4.3　生根接种方法 从继代苗中选取高的壮苗，将苗剪成每段一个茎节，然后插入到生根培养基上，每瓶7~8株为宜。过多影响根的生长，过稀则浪费培养基面而降低繁殖率。 4. 4　生根培养 4.4.1前期培养 根据生产经验，罗汉果生根的前一阶段一定要在黑暗的条件下诱导培养6～8天才 能生根，不然很难生根。但要注意的是前期暗光处理时间不能太长,否则易产生侧生芽， 一般可以根据实际，苗开始诱导几根短小的根就可以掀开遮盖物了。 4.4.2后期培养 生根后要及时的拿到培养架上，增强光照，一般在2000LX的光照强度下进行培养， 以利于进行光合作用，使苗变绿变粗。如果后期不能及时的见光培养，那苗会易产生 侧芽，茎尖死烂。如果因不及时光照培养而长出侧生芽，可以通过增强光照来抑制其 的生长。大约10天左右就可以看到小苗长出较发达的根系。因此生根培养在管理