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蛋白质的生物合成（翻译）Protein Biosynthesis，Translation 蛋白质的生物合成，即翻译，就是将核酸中由 4 种核苷酸序列编码的遗传信息，通过遗传密码破译的方式解读为蛋白质一级结构中20种氨基酸的排列顺序 。 蛋白质合成体系Protein Biosynthesis System 无细胞体系 无细胞系统（cell-free?system）是一种体外实验工具，用于研究生物发生反应。 cell-free?system来源于细胞，而不具有完整的细胞结构，但包含了进行正常生物学反应所需的物质（如供能系统和酶反应体系等）组成的体系即为非细胞体系。 严格来说，PCR就是一种无细胞体系运作程序 从mRNA 5?端起始密码子AUG到3?端终止密码子之间的核苷酸序列，各个三联体密码连续排列编码一个蛋白质多肽链，称为开放阅读框架(open reading frame, ORF)。 遗传密码表 密码子、反密码子配对的摆动现象 4. 通用性(universal) 蛋白质生物合成的整套密码，从原核生物到人类都通用。 已发现少数例外，如动物细胞的线粒体、植物细胞的叶绿体。 密码的通用性进一步证明各种生物进化自同一祖先。 硒代半胱氨酸 原核生物和真核生物某些酶的组分，是半光氨酸中的硫被硒所替代形成的特殊氨基酸。 不是翻译后修饰的结果，而是在翻译的过程中掺入的，并有其相应的密码子，因而硒代半胱氨酸被认为是蛋白质的第21种氨基酸。 5.原核生物和真核生物mRNA的某些特点 核蛋白体的组成 在A位处5SrRNA有一序列能与氨酰-tRNA的TψC环的保守序列互补，以利于延长用的氨酰-tRNA进入位，而起始用的tRNA无此互补序列，因此进入核糖体时，他只能进到P位。 3’端CCA氨基酸结合位点 氨酰-tRNA合成酶识别位点 核糖体识别位点 反密码子位点 第二节蛋白质的合成过程 氨基酸的活化 氨基酸的转运 肽链合成的起始 肽链合成的延长 肽链合成的终止 氨基酸与特异的tRNA结合形成氨酰-tRNA的过程称为氨基酸的活化。 参与氨基酸的活化的酶：氨酰-tRNA合成酶。 tRNA与酶结合的模型 氨酰-tRNA合成酶对底物氨基酸和tRNA都有高度特异性。 每种氨基酸的活化至少需要一种特定的氨酰-tRNA合成酶。 氨酰- tRNA合成酶和tRNA之间的相互作用和tRNA分子中某些碱基或碱基对决定着携带专一氨基酸的作用，被称为第二套遗传密码系统。 氨酰-tRNA合成酶具有校正活性(proofreading activity) 。 氨酰-tRNA的表示方法： tRNA与酶结合的模型 真核生物： Met-tRNAiMet 肽链合成起始 指mRNA和起始氨基酰-tRNA分别与核蛋白体结合而形成翻译起始复合物 (translational initiation complex)。 （一）原核生物翻译起始复合物形成 核蛋白体大小亚基分离； mRNA在小亚基定位结合； 起始氨基酰-tRNA的结合； 核蛋白体大亚基结合。 （二）真核生物翻译起始复合物形成 二、肽链合成延长 指根据mRNA密码序列的指导，次序添加氨基酸从N端向C端延伸肽链，直到合成终止的过程。 延伸过程所需蛋白因子称为延长因子(elongation factor, EF) 原核生物：EF-T (EF-Tu, EF-Ts) EF-G 真核生物：eEF-1 、eEF-2 又称注册(registration) （二）转肽 （三）移位 延长因子EF-G有转位酶( translocase )活性，可结合并水解1分子GTP，促进核蛋白体向mRNA的3侧移动 。 遗传密码子特点 无标点和不重叠(连续性) 简并性 摆动性 通用性 多聚核糖体(polysome) 蛋白质合成后的加工Posttranslational Processing Protein Transportation 主要包括 从核蛋白体释放出的新生多肽链不具备蛋白质生物活性，必需经过不同的翻译后复杂加工过程才转变为天然构象的功能蛋白。 2、信号肽的切除 信号肽的裂解：信号肽被特异的信号肽酶作用下除去。（详见第五节） 5、糖链的连接 在多肽链合成时或合成后，在酶的催化下，糖链可通过N-糖苷键与肽链中的天冬酰胺或谷氨酰胺的酰胺N连接，也可通过O-糖苷键与丝氨酸或苏氨酸的羟基氧相连，形成糖蛋白或蛋白聚糖。 新生肽链的折叠在肽链合成中、合成后完成，新生肽链N端在核蛋白体上一出现，肽链的折叠即开始。可能随着序列的不断延伸肽链逐步折叠，产生正确的二级结构、模序、结构域到形成完整空间构象。 一般认为，多肽链自身氨基酸顺序储存着蛋白质折叠的信息，即一级结构是空间构象的基础