高一生物必修2基因工程及其应用王佳丽资料.pptVIP

5）质粒的特点 （1）拟核或细胞核外能自主复制的小型环状DNA分子 （2）质粒的存在对宿主细胞无影响 （3）质粒的复制只能在宿主细胞内完成。 　　胰岛素从猪、牛等动物的胰腺中提取，100Kg胰腺只能提取4-5g的胰岛素，其产量之低和价格之高可想而知。 　　将合成的胰岛素基因导入大肠杆菌，每2000L培养液就能产生100g胰岛素！使其价格降低了30%-50%! 3、　环境保护　　 基因工程做成的“超级细菌”能吞食和分解多种污染环境的物质。 　　通常一种细菌只能分解石油中的一种烃类，用基因工程培育成功的“超级细菌”却能分解石油中的多种烃类化合物。有的还能吞食转化汞、镉等重金属，分解DDT等毒害物质。 * 第六章 从杂交育种到基因工程 抗虫害的玉米 不抗虫害的玉米 能发荧光的热带斑马鱼 普通热带斑马鱼是不发荧光的 甲生物 乙生物 取出优秀基因 新类型 表达　 新的生物产品　 基因工程 2、原 理： 基因重组(变异类型) 3、操作水平：DNA分子水平 4、操作环境：生物体外 5、结 果：获得人类所需要的品种。 1、概念：又叫做基因拼接技术或DNA重组技术通俗的说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的性状。 6、目 的：定向地改造生物的性状 １、基因的剪刀——限制性内切酶（限制酶） 1）存在：主要在微生物中 2）特点：特异性（酶的专一性） 即一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNA分子。 例如：大肠杆菌(EcoRi)的一种限制酶能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。 3）结果：产生黏性末端（碱基互补配对） 同一种限制性内切酶即使切割不同的DNA分子，黏性末端也相同 限制酶 什么叫黏性末端？ 被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。 基因的针线：DNA连接酶 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G 用同种限制酶切割 2、基因的“针线”——DNA连接酶 作用结果：把DNA黏性末端之间的缝隙“缝合”起来 作用实质：催化磷酸和脱氧核糖形成磷酸二酯键 1）作用：与外源基因整合并把重组DNA转移到受体细胞中去，在受体细胞内对外源基因进行大量复制并表达 3、基因的运载工具 — 运载体 2）常用种类： （1）细菌质粒（最常用） （2）噬菌体或某些动植物病毒 3）运载体具备条件 （1）能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。 （2）具多个限制酶切点，以便与各种外源基因连接 （3）具有某些标记基因，便于进行筛选。 如抗菌素的抗性基因、产物具有颜色反应的基因等。 4）大肠杆菌的质粒： 最常用的质粒是大肠杆菌的质粒，其中常含有抗药基因，如四环素的标记基因。质粒的存在与否对宿主细胞生存没有决定性作用，但复制只能在宿主细胞内完成。 四个基本步骤： 1）提取目的基因 2）目的基因与运载体结合 3）将目的基因导入受体细胞 4）目的基因的检测和表达 步骤一：提取目的基因 目的基因是人们所需要转移或改造的基因。 如苏云金芽孢杆菌的抗虫基因，还有植物的抗病（抗病毒、抗细菌）基因、种子贮藏蛋白的基因，以及人的胰岛素基因、干扰素基因等。 直接分离基因 人工合成基因 目的基因的提取方法 步骤二：目的基因与运载体重组 　　用与提取目的基因相同的限制酶切割质粒使之出现一个切口，将目的基因插入切口处，让目的基因的黏性末端与切口上的黏性末端互补配对后，在连接酶的作用下连接形成重组DNA分子。 细菌 供体细胞 取出质粒 取出DNA 用限制酶切断DNA 用连接酶连接目的基因 目的基因与运载体的结合过程，实际上是不同来源的基因重组的过程。 步骤三：目的基因导入受体细胞 将重组DNA导入受体细胞 扩增 步骤四：目的基因的检测和表达 　　大量的受体细胞接受一定的目的基因。处理的受体细胞中真正摄入了目的基因的很少，必须将它从中检测出来。 将每个受体细胞单独培养形成菌落，检测菌落中是否有目的基因的表达产物。淘汰无表达产物的菌落，保留有表达产物的进一步培养、研究。 无表达产物 无表达产物 有表达产物 无表达产物 　　 不能，受体细胞必须表现出特定的性状，才