DNA酶切及电泳剖析.pptVIP

电泳是分离、鉴定和纯化DNA片段的常用方法。 该技术操作简便、快速，可以分辨用其他方法所无法分离的DNA片段。 直接用低浓度的荧光嵌入染料进行染色，可确定DNA在凝胶中的位置。 少至1-10ng的DNA条带即可直接在紫外灯下检出。 电泳后的DNA条带还可以从凝胶中回收，用于克隆操作。 Gel electrophoresis 琼脂糖水平凝胶电泳 Gel electrophoresis 聚丙烯酰胺垂直电泳 琼脂糖是从海藻中提取出来的一种线状高聚物，其基本结构为： 现在琼脂糖已高度商品化，可以从商家购得高质量的琼脂糖凝胶。 Gel electrophoresis 电泳槽 电泳板、梳子（孔数） 电泳仪（恒压） 凝胶（可反复使用） 缓冲液 控制污染，注意安全 Gel electrophoresis 点样孔 核酸条带 Gel electrophoresis 1）DNA分子的大小。对于相同结构的DNA分子，一般来说，分子量越小，其电泳速度越快。分子越大，则磨擦阻力越大，就越难在凝胶空隙中蠕动，因而迁移得越慢。 2）DNA的构象。分子量相同的超螺旋环状、带切口环状及线状DNA通过凝胶时速度不一。 3）琼脂糖浓度。DNA电泳迁移率的对数与凝胶浓度成线性关系。采用不同浓度的凝胶可分辨范围不同的DNA分子。 影响DNA在琼脂