碱性磷酸酶分离纯化及性质与研究.doc新.docVIP

碱性磷酸酶的分离纯化与性质研究 生物技术1101班 其曼古丽·麦麦提 201131301028 摘要：经过匀浆，正丁醇处理，凝胶过滤等步骤，从猪肝中部分纯化了碱性磷酸酶。以磷酸苯二钠为底物，测得该酶的最适 pH为10， 最适温度为37℃， Km = 1.6565。KH2PO4对酶的活性有不同程度的抑制作用。 关键词：猪肝，碱性磷酸酶，分离纯化，性质 碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,简称AKP) 是一种底物专一性较低的磷酸单酯酶，广泛存在于人体、动物、植物与微生物中，在生物体内直接参与了磷酸基团的转移和代谢过程【1】。它在脊椎动物的骨化过程中发挥了重要作用【1】。海洋中的甲壳动物锯缘青蟹体内的碱性磷酸酶是其赖以生长、生存的重要酶类之一，它对海水中钙质的吸收、磷酸钙的形成、甲壳素的形成与分泌都具有重要作用【2】。提纯的碱性磷酸酶可用于核酸研究、毒物学研究及医学研究【3】。由于有益于皮肤细胞的再生和新陈代谢，该酶还可添加到药用化妆品中【4】。为了满足生产实践上的需要，仅国内以猪肝为材料来分离纯化碱性磷酸酶并对其性质进行分析的研究工作即已有若干。 1.1 材料与方法 1.1.1 实验材料 新鲜的猪肝脏。 1.1.2试验仪器 玻璃匀浆器，离心机，加样抢，恒温水浴锅。 1.1.3试验试剂 0.5mol/L醋酸镁溶液；2，0.1