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目的要求 本章内容 二、凝集反应的特点: 4. IgM的作用比IgG大数百倍 5. IgG与抗原结合后,常不出现凝集反应,称不完全抗体 三、凝集反应的分类 Sectiong 1 直接凝集反应(direct agglutination) 原理: 一、玻片凝集试验(定性): 二、试管凝集试验 Sectiong 2 间接(或被动)凝集反应(indirect /passive agglutination) 一、载体的种类及处理方法 (一)载体的种类 (二)载体的处理 间接凝集试验类型 1.正向间接凝集试验 2. 反向间接凝集试验 3.间接凝集抑制试验 4.协同凝集试验 协同凝集试验 三、间接血凝试验(hemagglutination test) 四、胶乳凝集试验 (latex agglutination test) 五、各型凝集反应比较 六、间接凝集反应的应用 * 第四章 凝集反应 (agglutination reaction) 徐文锦 临床免疫学 检验教研室 掌握 各类凝集反应的 基本原理及临床应用 熟悉 凝集反应的基本概念、 特点和类型 了解 凝集素、凝集原、SPA的概念 第一节 直接凝集反应 1 第二节 间接凝集反应 2 第三节 抗球蛋白试验 3 概述 一、基本概念: 细菌、红细胞等颗粒性抗原或可溶性抗原(或抗体)与载体颗粒结合成致敏颗粒后,与相应抗体(或抗原)在适当电解质存在下,形成肉眼可见的凝集现象,称为凝集反应(agglutination)。反应中的抗原称为凝集原(agglutinogen),抗体称为凝集素(agglutinin)。 颗粒性抗原 + 相应抗体 凝集块 (或抗原) (或致敏颗粒) (肉眼可见) 电解质 凝集原 凝集素 1.过程:两个阶段 抗原抗体特异性结合 可见凝集现象 2. 结果判断:以定性试验为主(阴性或阳性),或可半 定量 [效价或滴度(titer)]。 3. 灵敏度:高于沉淀反应。 正向间接凝集 反向间接凝集 间接凝集抑制试验 协同凝集试验 直接凝集反应 间接凝集反应 玻片凝集 试管凝集 间接凝集 间接血凝 胶乳凝集试验 明胶凝集试验 特殊凝集反应 自身红细胞凝集试验 抗球蛋白试验 电解质 颗粒性抗原 + 相应抗体 凝集块(肉眼可见) 方法:玻片法、试管法、微量血凝反应板法 肉眼或显微镜观察,凝集者为阳性, 用于细菌鉴定、血清学分型、血型鉴定等。 Ab+Ag c 可半定量,以效价报结果,即以产生明显凝集现象的最高血清稀释度为该Ab的效价。 颗粒性抗原 + 一系列稀释血清 凝集 用途: 肥达试验(Widal test)——伤寒、副伤寒的辅助诊断。 外斐试验(Weil-felix test)——斑疹伤寒、恙虫病的辅助诊断。 交叉配血试验等。 1/2 1/4 1/8 1/16 1/32 1/64 1/128 1/256 1/512 1/1024 Pos. Neg. Titer 64 8 512 2 32 128 32 4 Patient 1 2 3 4 5 6 7 8 间接血凝试验 试管凝集试验 可溶性抗原(或抗体)——载体 ( 致 敏 颗 粒) 吸附 + 相应抗体(或抗原) 可见凝集块 原理 电解质 红细胞处理 醛化(甲醛、戊二醛、丙酮醛)——RBC不易溶血 鞣酸处理—— 增强RBC吸附蛋白质的能力 正向间接凝集反应 间接凝集抑制试验 反向间接凝集反应 协同凝集反应 二、间接凝集试验类型 载体 Ag 查 Ab 抗原致敏颗粒 载体 凝集(+) 载体 载体 载体 载体 1 载体 Ag 变性IgG Ab RF 载体 Ab 查 Ag 抗体致敏颗粒 载体 Ab 凝集(+) ?Ag 载体 载体 载体 载体 载体 (抗—AFP) (AFP) 载体 Ag Ag Ab 查 A + Ab ?Ag Ag--Ab 抗原致敏颗粒 不凝集(+) B Ab Ag--Ab 无Ag 游离抗体 抗原致敏颗粒 凝集(—) 间接凝集抑制试验 反向间接凝集抑制试验 载体 查 Ab + Ag) (Ab Ab 查 Ag 金葡菌 SPA 抗体致敏金葡菌 ?Ag 凝集(+) 脑膜炎球菌 流脑抗体 1/2 1/4 1/8 1/16 1/32 1/64 1/128 1/256 1/512 1/1024 Pos. Neg. Titer 64
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