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Thanks DNA/RNA的琼脂糖凝胶电泳 实验原理 实验仪器、材料与试剂 实验步骤 注意事项与实验技巧 凝胶电泳是分离和纯化DNA片段最常用的技术； 分离、鉴定和提纯核酸首选的标准方法。 根据制备凝胶的材料: 琼脂糖电泳 凝胶 电泳 聚丙烯酰胺电泳 一、实验原理 （1）某物质在电场作用下的迁移速度叫做电泳的速率，电泳的速率与核酸分子大小和构型有关。DNA分子在碱性缓冲液中带负电荷，在外加电场作用下向正极泳动。分子质量越小跑得越快，紧密构型快于松散型开环分子或线性分子，从而可以分离大小不同的DNA或RNA分子。 DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时，有电荷效应与分子筛效应。不同DNA的分子量大小及构型不同，电泳时的泳动率就不同，从而分出不同的区带。 （2）琼脂糖是一种线性多糖聚合物，可以形成具有刚性的滤孔，凝胶孔径的大小决定于琼脂糖的浓度。浓度越高，孔隙越小，其分辨能力就越强。 分离长度 凝胶电泳 琼脂糖凝胶电泳 200bp—近50kb 聚丙烯酰胺凝胶电泳 5—500bp 分辨率高 采用不同浓度的凝胶可以分辨范围广泛的DNA分子。 含不同量琼脂糖的凝胶的分离范围 凝胶中的琼脂糖含量 [%（W/V）] DNA/RNA分子的分离范围（ kb ） 0.3 5—60 0.6 1—20 0.7 0.8—10 0.9 0.5—7 1