沙门菌检测方法介绍教程.pptVIP

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此方法不鉴定伤寒沙门氏菌 * 沙门菌检测方法介绍 沙门菌(Salmonella) 沙门菌属(Salmonella)是一大群寄生于人类和动物肠道内生化反应和抗原构造相似的革兰氏阴性杆菌统称为沙门杆菌。 沙门菌(Salmonella) 目前至少有67种O抗原和2000个以上血清型,所致疾病称沙门菌病。 肠热症:是伤寒病和副伤寒病的总称,主要由伤寒杆菌和甲、乙、丙型副伤寒杆菌引起。 急性肠炎(食物中毒):是最常见的沙门杆菌感染。多由鼠伤寒杆菌、猪霍乱杆菌、肠炎杆菌等引起。 败血症:常由猪霍乱杆菌、丙型副伤寒杆菌、鼠伤寒杆菌、肠炎杆菌等引起。 大小0.6~1.0×2~3um,无芽胞,一般有鞭毛(鸡沙门菌除外),无荚膜,多数有菌毛,革兰氏阴性杆菌,需氧或兼性厌氧,最适生长温度为35~37℃,最适pH值为6.8~7.8。 沙门菌生物学性状 不分解乳糖(亚利桑那菌除外)。分解葡萄糖产酸产气(伤寒沙门菌产酸不产气)。多数产生H2S,不产生靛基质,不液化明胶,不分解尿素,不产生乙酰甲基甲醇,多数能利用枸橼酸盐,能还原硝酸盐为亚硝酸盐,在氰化钾培养基上不生长。 沙门菌生物学性状 沙门菌常用生化试验 三糖铁(TSI) 尿素酶试验 阴性(黄)阳性(红) 沙门菌常用生化试验 吲哚试验 阴性(液面黄)阳性(液面红) VP试验 阳性(红色)阴性(不变) 沙门菌常用生化试验 赖氨酸脱羧酶试验 对照 阳性(紫) 阴性(黄) 丙二酸盐试验 阳性(兰) 阴性(不变) ONPG试验(β-半乳糖苷酶的底物 ) 邻硝基苯β-D-半乳吡喃糖苷 阳性(黄) 空白 沙门菌常用生化试验 国内外沙门菌检测方法(传统方法) 国家标准 药典标准 国标沙门菌的分离和鉴定 样品5g/5ml 50ml0.9%无菌氯化钠溶液(浸泡1h) 亚硒酸盐胱氨酸增菌液(sc)80ml 45± 0.5℃ 水浴30min(溶解) 35± 1℃ 18~24h 48h 四磺酸亮绿培养基100ml 曙红亚甲蓝琼脂平板 革兰染色 取上述供试液8ml 10~100cfu/ml阳性对照菌液1ml(10-6); 上述样液1ml 黑色 浑浊 10g/10ml样品 200mL 营养肉汤 35℃ or 37℃ 18~24 h 0.1mL上述培养物 10ml 四硫磺酸钠亮绿培养基 35℃ or 37℃ 20~24h 麦康凯琼脂(或曙红亚甲蓝琼脂)培养基 胆盐硫乳琼脂(或沙门、志贺菌属琼脂)培养基 三糖铁琼脂培养基纯化可疑菌落 每个平板选2~3个疑似菌落 35℃ or 37℃ 18~24h TSI,尿素酶,赖氨酸脱羧酶,ONPG,VP,吲哚 血清学试验 (O抗原,Vi抗原,H抗原) 报告结果 送参考实验室分型 微生物-沙门菌检测的药典通用方法 此方法不鉴定伤寒沙门氏菌 *

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