微生物的实验室培养(精华版)非常实用解析.pptVIP

专题2 :微生物的培养与应用 微生物的类群 原生生物： 原核生物: 真菌: 病毒: 如酵母菌 单细胞的动植物 如草履虫、单细胞藻类等 无细胞结构 真核细胞 细菌、蓝藻 原核细胞 一.培养基： 微生物生存的环境和营养物质 1.基本成分： 思考：微生物“吃”什么？ 碳源、氮源、水、无机盐 ⑴碳源 无机碳源： 有机碳源： CO2、CO32-、HCO3- 牛肉膏、蛋白胨等 自养微生物 异养微生物 ⑵氮源 无机氮源： 有机氮源： NH4＋、NO3- 牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等 培养基（培养液）是由人工方法配制而成的，专供 生长繁殖使用的混合营养液。 培养基可分为 和 。琼脂作 2.不管哪种培养基， 一般都含有 、 源、和 源、 等营养物质，另外还需要满足微生物生长对 、 营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶) 以及、 等的要求。 1.培养基的类型 微生物 水 碳 氮 无机盐 PH 特殊 氧气 凝固剂 固体培养基 液体培养基 牛肉膏蛋白胨培养基 是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。 1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的配方 H2O 定容至1000ml Nacl 5g 蛋白胨 10g 牛肉膏 5g 琼脂20.0g 分析营养构成？ 阅读“无菌技术”，回答下列问题： 获得纯净培养物的关键是 。 无菌技术包括： （1）对实验操作空间、操作者的衣着和手进行 清洁和 ； （2）将培养器皿、接种用具和培养基等器具 进行 ； （3）为避免周围微生物污染，实验操作应在 旁进行； （4）避免已灭菌处理的材料用具与 相接触。 阅读“无菌技术”，回答下列问题： 获得纯净培养物的关键是 防止外来杂菌的入侵 。 无菌技术包括： （1）对实验操作空间、操作者的衣着和手进行 清洁和消毒 ； （2）将培养器皿、接种用具和培养基等器具 进行 灭菌 ； （3）为避免周围微生物污染，实验操作应在 酒精灯火焰附近 旁进行； （4）避免已灭菌处理的材料用具与 周围物品 相接触。 （二）无菌技术 条件 结果 常用的方法 消毒 灭菌 较为温和的物理或化学方法 强烈的理化因素 仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物，不包括芽孢和孢子 杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子 煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法 灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌 消毒方法： （1）日常生活经常用到的是 消毒法； 100℃煮沸5-6min （2）对一些不耐高温的液体，则使用 消毒法70-75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min （3）对接种室、接种箱或超净工作台 首先喷洒 等溶液以增强消毒效果，然后使用 进行物理消毒。 （4）实验操作者的双手使用 进行消毒； （5）饮水水源用 进行消毒。 煮沸 巴氏 石炭酸或煤酚皂 紫外线 75%酒精 氯气 1、灼烧灭菌 2、干热灭菌：160-170 ℃下加热1-2h。 3、高压蒸汽灭菌：100kPa、121 ℃下维持15-30min. (2)灭菌的方法： 灭菌方法： （1）接种环、接种针、试管口等使用 灭菌法； （2）玻璃器皿、金属用具等使用 灭菌法，所用器械是 干热灭菌箱 ； （3）培养基、无菌水等使用 灭菌法，所用器械是 高压蒸汽灭菌锅 。 灭菌方法： （1）接种环、接种针、试管口等使用 灼烧 灭菌法； （2）玻璃器皿、金属用具等使用 干热 灭菌法，所用器械是 干热灭菌箱 ； （3）培养基、无菌水等使用 高压蒸汽 灭菌法，所用器械是 高压蒸汽灭菌锅 。 牛肉膏蛋白胨固体培养基的配制 1 计算：根据 比例，计算100mL培养基各成分用量。 2 称量：准确称取各成分。称取牛肉膏和蛋白胨时动作要迅速，目的是防止牛肉膏蛋白胨 。 3 溶化：①加水加热溶化 ；②加入 和 继续加热；③加入 ；④用蒸馏水定容到 。整个过程不断用玻棒 ，目的是防止琼脂糊底而导致烧杯 。 4 调pH：用1mol/LNaOH溶液调节pH至偏碱性。 5 灭菌： 将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加塞包扎后用 灭菌锅灭菌；所用培养皿用报纸包扎后用