移植配型的分子分型法解析.pptVIP

PCR-SSP分型法操作步骤 1．基因DNA提取 2．引物混合物的组成 3．TaqDNA聚合酶 4．扩增条件的选择 5．电泳 6．结果判断 3．PCR-SSO（PCR序列特异性寡核苷酸探针）技术分型原理是：应用位点或组间特异引物对HLA的多态区域进行PCR扩增，扩增过程中对产物进行放射性同位素或非放射性标记，根据碱基配对原则设计系列寡核苷酸探针并将其固定在膜上，PCR产物与膜上探针进行特异性杂交反应，最后通过放射自显影、显色或化学发光的信号进行结果判断。如果探针与产物DNA结合则结果阳性，反之，探针在洗膜中被洗脱，结果阴性。 目前PCR-SSOP、PCR-SSP和PCR-SBT方法是被国际组织相容性协作组推荐的HLA分型方法，其中PCR-SBT技术更被誉为HLA分型的金标准，是迄今为止最可靠、最彻底、最准确的HLA分型方法，同时也是发现和鉴定新的HLA等位基因的主要途径，但由于其检测成本昂贵、技术复杂，且需要特定设备及详尽的软件，因而在HLA临床常规分型中较少使用。 6.基因芯片技术 我国生物芯片技术获得重大突破！由军事医学科学院放射与辐射医学研究所王升启研究员领导的课题组，与深圳益生堂生物企业有限公司联合研制的HLA-DRB1分型基因芯片试剂盒，于2005年9月获得了由国家食品药品监督管理局（SFDA）颁发的新药证书和生产文号。这是在国家自然科学