第四章++基因在大肠杆菌和酵母的高效表达ppt.pptVIP

第四章 基因在大肠杆菌、酵母中的高效表达 本章目录 4.1 基因的表达系统与表达策略 4.1.1 基因的表达系统 4.1.2 根据表达蛋白用途选择基因的表达策略 4.2 基因在大肠杆菌中的高效表达 4.2.1 基于T7噬菌体RNA聚合酶/启动子的大肠杆菌表达系统 4.2.2 蛋白质的融合表达 4.2.3 蛋白质的分泌型表达 4.2.4 蛋白质的包含体形式表达与蛋白质复性 4.3 基因在酵母中的高效表达 4.3.1 酵母表达系统概述 4.3.2 甲醇酵母表达系统 4.3.3 组织纤溶酶原激活剂在甲醇酵母中的表达 第一节 基因的表达系统与表达策略 基因的表达系统 基因的高效表达策略 一、基因的表达系统 表达载体的组成： DNA复制及质粒DNA的筛选: 有DNA复制起点ori, 及Amp, Tet抗性基因 目的基因转录的调控系统:这一系统包括启动子,抑制物基因和转录终止子.启动子位于目的基因的上游,常用的如Placz等. 蛋白质的翻译系统:包括核糖体识别位点SD,翻译起始密码子和终止密码子. 表达系统的种类 原核表达系统 真核表达系统 酵母 植物拟南芥 昆虫 哺乳动物细胞系 一） 原核表达系统：细菌 二）真核表达系统 二、基因的高效表达策略 用于生物化学和分子生物学研究： 重点考虑如何保持蛋白质原有的功能 表达蛋白用作抗原：合成天然蛋