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第四章 DNA重组技术 第一节 分子克隆中所用的酶 一 限制性内切酶（Restriction endonuclease） 定义：特异性地结合在一段特殊DNA序列之内或附近，并在此处切割双链DNA的一类核酸内切酶。 2 识别和断裂（recognition and cleavage） 识别序列的长度都为4-6个base paires，将磷酸根给了5ˊ-OH，得到5ˊ-P，3ˊ-OH。断裂的末端： 形成平头末端（blunt terminus end） 得到5ˊ的突出末端（5ˊ-protruding end） 得到3ˊ的突出末端（3ˊ-protruding end） 3 特殊的Ⅱ类RE： 同裂酶（Isoschizomer） 把许多来源不同，但可切割同一靶序列的限制酶，即所识别的位点中有相同的碱基序列。如：HpaⅡ和MspⅠ 5ˊ…C ↓ CGG…3ˊ，可用来分析甲基化位点。 ②Subset酶 识别与切割序列相互有关的酶：如：Mbo I 5ˊ…↓GATC BclI 5ˊ…T↓GATCA BamHI 5ˊ…G↓GATCC SmaI 5ˊ…CCC ↓GGG Hpa Ⅱ 5ˊ…CC↓ GG ③远距离裂解酶：断裂住点在识别序列后端几个到10几个bp。如：MboⅡ GAAGA（8/7）后第8个或第7个