8酶的生产摘要.pptVIP

植物、动物、微生物细胞的特性比较 (3)酶的分离纯化 细胞培养完成后，收集细胞，经过细胞破碎、提取、分离得到超氧化物歧化酶。 二、动物细胞培养产酶 1.动物细胞培养的特点 细胞生长速度慢。（需添加抗生素） 细胞体积大，无细胞壁保护，对剪切力敏感。 反应过程成本高，产品价格贵。 细胞具有锚地依赖性。 原代细胞一般繁殖50代。 2.培养基 ①天然培养基 ②合成培养基 ③无血清培养基 3.培养方法 (1)悬浮培养(suspension culture) (2)贴壁培养(anchorage-dependent culture) (3)贴壁－悬浮培养(pseudo-suspension culture) 微载体培养(microcarrier culture) 包埋(entrapment)和微囊(microencapsulation)培养 结团培养(aggregate culture) 4.培养条件的影响与控制 （1）温度：一般控制在36.5℃. （2）pH值：一般控制在7.0-7.6的微碱性范围内。 （3）渗透压: 应与细胞内渗透压相同。 （4）溶解氧：根据情况随时调节。 第一节 酶的合成模式 第二节 微生物细胞发酵产酶 第三节 植物、动物细胞产酶 本章总结 * * 第六章 酶的生产 提取分离法 微生物细胞发酵产酶 酶的生产方法 生物合成法 植物细胞发酵产酶 化学合成法 动物细胞发酵产酶 第一节 酶的合成模式 第二节 微生物细胞发酵产酶 第三节 植物、动物细胞产酶 细胞生长曲线 O-A 延迟期 A-B指数生长期 B-C减速期 C-D 静止期 D-E 衰亡期 细胞生长的5个阶段 第一节 酶的合成模式 酶生物合成的模式 根据酶的合成与细胞生长之间的关系，可将酶的生物合成分为3种模式，即： 同步合成型 生长偶联型—— 中期合成型 部分生长偶联型——延续合成型 非生长偶联型 —— 滞后合成型 1. 生长偶联型（又称同步合成型） 酶的生物合成与细胞生长同步。 特点：酶的合成可以诱导，但不受分解代谢物阻遏和反应产物阻遏。 当去除诱导物、细胞进入平衡期后，酶的合成立即停止，表明这类酶所对应的mRNA很不稳定。 生长偶联型中的特殊形式——中期合成型 酶的合成在细胞生长一段时间后才开始，而在细胞生长进入平衡期以后，酶的合成也随着停止。 特点：酶的合成受产物的反馈阻遏或分解代谢物阻遏。 所对应的mRNA是不稳定的。 枯草杆菌碱性磷酸酶合成曲线 2.部分生长偶联型（又称延续合成型） 酶的合成在细胞的生长阶段开始，在细胞生长进入平衡期后，酶还可以延续合成较长一段时间。 特点：可受诱导，一般不受分解代谢物和产物阻遏。 所对应的mRNA相当稳定。 黑曲霉聚半乳糖醛酸酶合成曲线 3. 非生长偶联型（又称滞后合成型） 只有当细胞生长进入平衡期以后，酶才开始合成并大量积累。许多水解酶的生物合成都属于这一类型。 特点：受分解代谢物的阻遏作用。 所对应的mRNA稳定性高。 黑曲霉酸性蛋白酶合成曲线 总结：影响酶生物合成模式的主要因素 高：可在细胞停止生长后继 1）mRNA的稳定性 续合成酶 差：随着细胞停止生长而终 止酶的合成 2）培养基中阻遏物的存在 不受阻遏：随着细胞的生长而开始酶的合成。 受阻遏：细胞生长一段时间或平衡期后，酶才开始 合成。 酶生产中最理想的合成模式： 延续合成型：发酵过程中没有生长期和产酶期的明显差别。细胞开始生长就有酶的产生，直至细胞生长进入平衡期后，酶还可以继续生成一段时间。 对于： 同步合成型：提高对应的mRNA的稳定性，如降低发酵 温度 。 滞后合成型：尽量减少甚至解除分解代谢物阻遏，使