实验十五：酸性磷酸酶的显示.pptVIP

实验十一：细胞内化学成分的显示方法——酸性磷酸酶的显示 【课前预习】 1．溶酶体分为几类，各有何特点？ 2．溶酶体是如何形成的？其标志酶是什么？如何在显微镜下显示？ 3．溶酶体具有哪些功能？ 【目的要求】 1．熟悉酸性磷酸酶显示方法的原理及操作步骤 2．观察酸性磷酸酶在细胞中的分布 【基本原理】 1．细胞化学：细胞化学是在保持细胞原有形态结构的基础上，利用已知的化学反应原位显示细胞内的某种化学成分，然后通过显微镜进行定性、定位、定量研究的科学。 2．细胞化学技术要求：保持样品的形态结构不发生改变；保存细胞内生前化学成分及酶的活性；显示成分的化学反应必须对将被显示的化学物质有高度特异性和高度灵敏性；反应所生成的产物要在原位沉淀、显色明显、不溶、不扩散，并在重复实验中结果一致。 3．染色的作用：由于正常的生物组织是无色透明的，因此无法在光镜下进行观察。因此必须要对样品进行染色；染色剂可以渗透到组织的间隙中，细胞中的蛋白质等成份可以吸附不同的色素粒子；染色剂中的阳离子和阴离子可分别与细胞中的酸性、碱性物质相结合。染色就是根据这些原理，利用染色剂与细胞内含物的物理作用与化学作用，将细胞和组织染成各种不同的颜色；由于染色剂的化学性质不同，以及固定材料时所用的固定剂不同，染色剂对被染色的组织有一定的选择性，从而使某些部位染色很清楚，而另一些部位可能完全不着色。例如，有些染色剂可染细胞核，有些