农药残留的快速检测课程.ppt

蔬菜中农药残留快速检测技术内蒙古农产品质量安全综合检测中心农业部农产品质量安全监督检验测试中心（呼和浩特）张三粉 2014.06  报告内容一、检测原理二、检测范围及灵敏度三、试剂配制及保存四、取样要求五、检测步骤六、结果判定七、注意事项 一、检测原理用丁酰胆碱酯酶检测常用有机磷及氨基甲酸酯类农药。丁酰胆碱酯酶（BchE）+拟除虫菊酯类等农药→酶活性不被抑制 酶 显色剂底物 分解物 黄色溶液丁酰胆碱酯酶（BchE）+ 有机磷或氨基甲酸脂类农药 酶活性被抑制 显色剂 无分解产物 无色溶液  酶 底物 显色剂 少量分解产物 浅黄色溶液 活性被抑制 含有机磷或氨基甲酸脂类农药 丁酰胆碱酯酶 （BchE）+ 样本  活性正常 不含有机磷或氨基甲酸脂类农 药 二、检测范围及灵敏度蔬菜：叶菜、果菜、豆菜、瓜果等（除胡萝卜、韭菜、茭白、蘑菇等）农药：A 有机磷类甲胺磷、对硫磷、氧化乐果、甲拌磷、久效磷、敌敌畏、杀扑磷等（灵敏度0.5-5mg/kg）。甲基对硫磷、水胺硫磷、甲基异柳磷、毒死蜱、乐果等（灵敏度8-10mg/kg）　　 　　B 氨基甲酸酯类克百威、涕灭威、灭多威、丙酸克百威、丁硫克百威、抗蚜威、仲丁威、速灭威、残杀威、西维因、叶蝉散（灵敏度0.2-2.5mg/kg）。 三、试剂的配制及保存 A、专用酶 配制：使用时每支酶粉用8毫升提取试剂溶解。 保存：粉状的酶应储存在冷冻室内（约-18℃），用时用提取液溶解，溶解后的酶液分成2-4小瓶，暂时不用的储存在冷冻室内，用时解冻，用后的酶液储存在冷藏室（0-5℃）。 B、底物 配制：使用时每瓶底物用10毫升提取液溶解。 保存：固体及溶解后的底物均应保存在冰箱的冷藏室内（0-5℃）。  C、显色剂配制：使用时每瓶显色剂用10毫升提取液溶解。保存：固体及溶解后的显色剂均应保存在冰箱的冷藏室内（0-5℃）。D、提取试剂配制：使用时每袋提取试剂用1000毫升蒸馏水溶解。 四、取样要求 1、叶菜:用取样器随机取不同植株的叶片。 2、果菜：用取样器沿果菜表面处取约1厘米厚的样本。 　 五、检测步骤 　 　 取2克样本（非叶菜类取4克），切碎 　 　 加入20毫升提取试剂，震荡1-2分钟将上清液倒入试管中，静置3-5分钟 　 　 　 于平底小试管中加入 50微升酶、3毫升样本提取液、 50微升显色剂在37℃-38℃下培养30分钟