在营养肉汤中32℃培养3d后,芽胞形成率在90%以上,80℃-85 ℃水浴5min-10min可刺激芽胞萌发。 2 设备和材料 除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其它设备和材料如下: 冰箱:2 ℃-5 ℃; 恒温培养箱:30 ℃±1 ℃、36 ℃±1 ℃; 均质器; 电子天平:感量0.1 g ; 无菌锥形瓶:100 mL、500 mL; 无菌吸管:1 mL(具0.01 mL刻度)、10 mL(具0.1 mL刻度)或微量移液器及吸头; 无菌平皿:直径90 mm; 无菌试管:18 mm×180 mm; 显微镜:10倍-100倍(油镜); L涂布棒。 观察有无游离芽胞(浅红色)和染成深红色的菱形、正方形或其它形状的蛋白结晶体。如发现游离芽胞形成的不丰富,应将培养物置室温2 d~3 d再行检查。放置3d~4d以上的苏云金芽胞杆菌培养物有大量的结晶体,但是只有在芽胞裂解通过上述染色方法才能见到。然而,除非见到芽胞,否则培养物应在室温继续放置几天以重新检查毒素晶体。其它芽胞杆菌不产生蛋白质毒素晶体。 如果: a)只有一个稀释度的平板菌落数在20 CFU~200 CFU之间且有典型菌落,计数该稀释度平板上的典型菌落; b)所有稀释度的平板菌落数均小于20 CFU且有典型菌落,应计数最低稀释度平板上的典型菌落; c)某一稀释度的平板菌落数大于200 CFU且有典型菌落,但下一稀释度平板上没有典
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