8离体蛙心灌流解说.ppt

离体蛙心灌流 实验目的 学习离体蛙心灌流的方法； 观察钠、钾、钙三种离子对心脏活动的影响。 观察肾上腺素、乙酰胆碱等因素对心脏活动的影响。 实验原理 作为蛙心起搏点的静脉窦能按一定节律自动产生兴奋。因此，只要将离体失去神经支配的蛙心保持在适宜的环境中，在一定时间被仍能产生节律性兴奋和收缩。 另一方面，心脏正常的节律性活动有赖于内环境理化因素的相对稳定，所以，改变灌流液的成分，则可以引起心脏活动的改变。 实验原理 工作细胞：普通的具有收缩能力的心肌细胞 自律细胞：组成特殊传导系统的心肌细胞 心肌收缩力：Ca2+ 心率：自律细胞4期自动除极速度 RP或MDP与阈电位之差 动物与器材 牛蛙 斯氏蛙心套管、套管夹、常用手术器械、任氏液、张力换能器、蛙心夹、0.65%NaCl溶液、 5%NaCl溶液、 2%CaCl2溶液、1%KCl溶液、1:5000肾上腺素溶液、1:10000乙酰胆碱溶液、300u/ml肝素溶液 方法与步骤 离体蛙心的制备：双毁髓→左主动脉结扎→左右两主动脉下方活结备用→剪口，插管（管内盛任氏液与肝素）→结扎备用线（套管＋左右主动脉）→剪断动脉→结扎并剪断静脉。 固定套管并用任氏液换洗血液；进入RM6240系统。 方法与步骤 观察并记录正常心搏曲线； 向套管内分别加入以下溶液（0.65%NaCl溶液置换任氏液 、 0.5%NaCl溶液1-2d、1%KCl溶液 1-2d 、2%CaCl2溶液1d 、1:5000肾上腺素溶液1-2d 、1:10000乙酰胆碱溶液1-2d ） ，观察并记录曲线变化。 0.5%NaCl 竞争性抑制Ca内流 胞浆内[Ca] ↓ 心肌细胞收缩力↓ 肾上腺素：主要与心肌的β1受体结合，产生正性变时、变力和变传导效应。 乙酰胆碱：与心肌细胞的M2受体结合，产生负性变时、变力和变传导效应。 具体作用机制见《大学生理学》P236~239、P248 注意事项 制备蛙心标本时，勿伤静脉窦； 各溶液作用一旦出现，应立即用新鲜任氏液换洗，以免心肌受损，而且待心跳恢复正常后方能进行下一步实验； 蛙心插管内液面应保持恒定； 每次更换或滴加溶液必须做标记； * * * 0.65% * *