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第三章 动物生物制品制造流程 第一节 疫苗的制造流程 一、概述 疫苗(vaccine)是指人工变异或从自然界筛选获得的减毒或无毒的活的病原微生物制成的制剂，或用理化方法将病原微生物杀死制备的生物制剂，用于人工自动免疫。 疫苗是由病原体制成的 疫苗是致病原的蛋白(多肽、肽)、多糖或核酸，以单一成分或含有效成分复杂颗粒的形式，通过活的减毒致病原或载体，进入机体后能产生灭活、破坏或抑制病原的特异性免疫应答。 疫苗种类 传统疫苗：灭活疫苗、减(弱)毒疫苗、亚单位疫苗 基因工程疫苗：重组亚单位疫苗、载体疫苗、基因缺失疫苗、核酸疫苗、蛋白质工程疫苗、转基因植物疫苗 合成肽疫苗 抗独特型抗体疫苗 微胶囊疫苗 二、细菌疫苗和类毒素疫苗的制造流程 三、病毒疫苗的制造流程----细胞疫苗 三、病毒疫苗的制造流程----组织疫苗 四、寄生虫疫苗的制造流程 五、基因工程疫苗 研究的多，应用的少 免疫原性不好 能产生抗体，但保护率低 研究进展：保护→表达→应用 基因工程疫苗一般流程： 分离抗原基因 与载体DNA连接 进入受体表达 抗原蛋白质分离纯化 疫苗 1、重组亚单位疫苗(recombinant subunit vaccines) 病原保护性抗原的DNA→克隆 →插入载体中重组→导入细胞→鉴定和筛选细胞→纯繁→表达制苗抗原多肽→纯化 加佐剂 表达系统：原核生物、真菌、昆虫细胞、 哺乳类细胞、转基因动植物 最常用的是：大肠杆菌和枯草杆菌 2、重组载体疫苗(vectored vaccines) 病原保护性抗原的DNA 插入至载体DNA 病毒载体DNA 共转染至受体细胞 重组病毒 鉴定、选择、纯繁 载体有：痘病毒、腺病毒、疱疹病毒、 细菌等活载体或非复制型载体 3、基因缺失疫苗(gene deleted vaccines) 基因打靶等方法毒力基因缺失 导入载体中 野毒株 共转染细胞  鉴定、筛选、纯繁 4、基因疫苗(genetic vaccines) 病原保护性抗原DNA导入载体DNA  直接肌肉注射 吸收入宿主细胞 表达合成抗原 加工、处理、修饰提呈给免疫系统 激发免疫应答 5、多肽疫苗(peptide vaccine) 人工合成病原保护性抗原多肽连接到大分子载体上 + 佐剂 免疫接种 六、抗独特型抗体疫苗(anti-idiotype vaccine) 单克隆抗体(Ab1) 免疫同系小鼠→ 抗独特型抗体(Ab2) 模拟抗原 诱异机体产生抗体(Ab3) 七、微胶囊疫苗(micro-capsulized vaccine) 是现代材料和工艺技术的改进 缓释作用 10-30μm微囊包裹抗原 肌注或口服 第二节 诊断用生物制品制造流程 诊断用生物制品(diagnosticum)包括：诊断抗原、诊断抗体、标记抗体、生物技术诊断试剂等 要求：敏感性高，特异性强 一、诊断抗原 血清学诊断抗原： 凝集反应抗原 沉淀反应抗原 补体结合反应抗原 变态反应抗原 重组表达抗原 1、细菌抗原常规制造 抗原制造： 菌液→灭菌→浓菌液→标化→检验 2、病毒抗原常规制造 病毒培养物→裂解细胞→病毒提纯→浓缩→标化 二、常规诊断抗体 抗血清 单克隆抗体 荧光素标记抗体 酶标记抗体 放射性同位素标记抗体 三、生物技术诊断试剂盒 重组表达抗原 核酸探针 聚合酶链反应 基因芯片等 课后复习题 基因工程疫苗的一般制备流程。 基因工程疫苗包括几种，简述各种基因工程疫苗的制备流程。 诊断用生物制品的最基本要求是 和 。包括 、 和 等三大类。 简述诊断制品中细菌抗原和病毒抗原的常规制备流程。 叙述禽流感H9亚