2 CELL STUCTUREFUNCTION OF PROKARYOTES-文字教案.docVIP

2. CELL STRUCTURE/FUNCTION OF PROKARYOTES 2.1.1 Light microscopy 2.1.2 Electron microscopy 2.1.3 Three-Dimensional Imaging 2.1.4 Staining and Cell morphology 2.2 Cell membranes and cell walls 2.2.1 Cell membrane 2.2.2 Cell walls 2.3 Surface structures and inclusions 2.3.1 Surface structures and inclusions 2.3.2 Endospores 2.4 Other bacteria 2.4.1 Actinomycetes 2.4.2 Cyanobacteria 2.4.3 Mycoplasmas, Chlamydia, Rickettsias 2.1 Microscopy and cell morphology 2.1.1 Light microscopy p56 Fig 4.1 0.5 λ Resolution 分辨率（最小可分辨距离）= ———— n sin θ 数值孔径值（Numerical Aperture，NA）: n sin θ n：玻片与物镜间介质的折射率 空气 (n=1.0)、水 (n=1.33)、香柏油 (n=1.52)、玻璃 ( n=1.54) θ:为物镜镜口角，它取决于物镜的直径和工作距离 用香柏油取代空气的作用：介质折射率提高, 数值孔径值和分辨率均得到提高; 香柏油与玻璃的折射率相近,很多原来由于在透镜及载片表面的反射和折射而损失的光线可以进入物镜，使照明亮度提高，改善观察效果。 特性 物镜 搜索物镜 低倍镜 高倍镜 油镜 放大倍数 4× 10× 40-45× 90-100× 数值孔径值 0.10 0.25 0.55-0.65 1.25-1.4 焦距（f） 40 mm 16 mm 4 mm 1.8-2.0 mm 工作距离 17-20 mm 4-8 mm 0.5-0.7 mm 0.1 mm 450nm光源（蓝光）时的分辨率 2.3 μm 0.9 μ m 0.35 μ m 0.18 μ m The highest resolution possible in a compound light microscope is about 0.2μm. Magnifications of about 1500×are near the upper limit obtainable 光学显微镜一般配置的最大放大倍数：: 目镜：10 ~ 15 ×；物镜： 100 ×；总放大倍数 1000~1500 × 0.2μm ×1000 = 0.2mm (人眼的分辨能力0.1-0.2 mm) 目镜的作用只是将物镜放大的实象进一步放大形成能见的虚象,目镜不可以提高分辨率 Bright-field microscopy (明视野显微镜) 照明光线直接进入视野，属透射照明。生活的细菌在明视野显微镜下观察是透明的，不易看清。 Many bacterial cells are difficult to see well with the bright-field microscope because of their lack of contrast with the surrounding medium. Pigmented organisms are an exception, because the color of the organism adds contrast, thus improving visualization Dyes can be used to stain cells and increase their contrast Fig.4.2 Dark-field microscopy (暗视野显微镜) 暗视野显微镜则利用特殊的聚光器实现斜射照明，给样品照明的光不直接穿过物镜，而是由样品反射或折射后再进入物镜，因此，整个视野是暗的，而样品是明亮的 反差增大,观察微粒的尺寸可以小于显微镜的分辨率. Phase-contrast microscopy(相差显微镜) 相差显微镜配备有特殊的光学装置——环状光阑和相差板，利用光的干涉现象，能将光的相位差转变为人眼可以察觉的振幅差（明暗差），从而使原来透明的细胞与 介质表现出明显的明暗差异，对比度增强。 相差板,装在相差物镜中,常刻有Ph(红色),或