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海大生物反应工程原理大全
均相酶促反应动力学是以研究酶促反应机制为目的解释了酶促反应机制和过程,还应对影响其反应速率的因素进行定量的分析,建立可信赖的反应速率方程,并以此为基础进行反应器的合理设计和确定反应过程的最佳条件。
均相酶pH、温度等
固定化酶的特性?
(1)底物专一性的改变 由于立体障碍,使的底物特异性发生改变。例如,胰蛋白酶既作用于高分子的蛋白质,又作用于低分子的肽或多肽。采用羧甲基纤维素对胰蛋白酶进行固定化后,胰蛋白酶对二肽或多肽的作用不变,但对酪蛋白的作用仅为游离酶的3%左右。
(2)稳定性增强 一般固定化酶比游离酶稳定性好,表现在热稳定性,保存和使用稳定性的增加,及对蛋白酶的抵抗性和耐受性增强。(3)最适pH值和最适温度变化 酶固定化载体为多聚阳离子性质时,固定化酶的最适pH值向酸性一侧移动;酶固定化载体为多聚阴离子性质时,固定化酶的最适pH值向碱性一侧移动;产物为酸性时,固定化酶最适pH值向酶性一侧移动;产物为中性时,最适pH值一般无变化。
(4)动力学参数的变化 酶经固定化后,表观米氏常数发生变化。
影响固定化酶促反应的主要因素?
(1)分子构象的改变指固定化过程中酶与载体的相互作用引起酶的活性中心或调节中心的构象发生了变化,导致酶与底物的结合力下降。
(2)位阻效应由于载体的遮蔽作用或固定化方法不当,给酶的活性中心或调节中心造成空间障碍 ,使底物和酶无法与酶接触。
(3)微扰效应由于载体的亲水性、疏水性、介电常数等性质,使酶所处的微环境与宏观环境不同,从而改变了酶的催化能力或酶对效应物的调节能力的效应。
(4)分配效应 由于载体与底物之间疏水性、亲水性或静电作用引起微环境和宏观环境之间物质的不等分配,从而影响酶促反应速率的一种效应
(5) 扩散效应由于底物、产物或其他效应物的迁移和传递速度所受到的限制,当物质扩散系数很低,酶活性较高时,在固定化周围形成浓度梯度,造成微观环境和宏观环境间底物、产物浓度产生差别。
快速平衡法:几点假设:1)[S]初始酶浓度e,中间复合物ES的形成不会降低[S]。(2)不考虑E+P→ES这个可逆反应。(3)ES→E+P为整个反应的限速阶段,此ES分解成产物不足以破坏这个平衡。
稳态法:几点假设:(1)(2)与快速平衡法相同(3)中间复合物ES一经分解,产生的游离酶立即与底物结合,使中间复合物ES浓度保持衡定。
影响Kla的因素,如何影响?
操作变量:温度、压力、通风量、转速。 ↑ Kla↑
培养液的理化性质:黏度、表面张力、氧的溶解度、培养液组成、培养液流动状态、发酵类型。 黏度↓、表面张力↓、氧的溶解度↑ Cpro↑ C酯醇酮↓ Kla↑
反应器的结构:反应器的类型、各部分尺寸的比例、空气分布器的型式。有挡板或冷却管、高径比 ↑ Kla↑ 搅拌器的组成与间距要根据培养液的特性决定
外扩散过程与内扩散过程的比较
外扩散过程 内扩散过程 Da准数是决定外扩散效率因子的唯一参数 准数是决定内扩散效率因子的主要参数 Da准数定义: 西勒准数定义: 外扩散效率因子定义: 内扩散效率因子定义: Da1,过程为反应控制,Da准数越小,越接近1;Da1,过程为外扩散控制,Da准数越大,越趋近于零。 0.3时,1,过程为反应控制。
0.3时,1,过程为内扩散控制。 举例简要说明何为微生物反应的结构模型?
答:由于细胞的组成是复结的,当微生物细胞内部所含有的蛋白质、脂肪、碳水化合物、核酸、维生素等的含量随环境条件的变化而变化时,建立起的动力学模型称为结构模型。
Monod方程建立的几点假设是什么?Monod方程与米氏方程主要区别是什么?
答:Monod方程建立的基本假设:微生物生长中,生长培养基中只有一种物质的浓度会影响其生长速率,这种物质被称为限制性基质,并且认为微生物为均衡生长且为简单的单一反应。
莫诺方程: 米氏方程: 描述微生物生长 描述酶促反应 经验方程 理论推导的机理方程 方程中各项含义:
μ:生长比速(h-1)
μmax:最大生长比速(h-1)
S: 单一限制性底物浓度(mol/L)
KS:半饱和常数(mol/L) 方程中各项含义:
r:反应速率(mol/L.h)
rmax:最大反应速率(mol/L.h)
S:底物浓度(mol/L)
Km:米氏常数(mol/L) 适用于单一限制性底物、不存在抑制的情况 适用于单底物酶促反应不存在抑制的情况 简要回答微生物反应与酶促反应的最主要区别?
答:微生物反应与酶促反应的最主要区别在于,微生物反应是自催化反应,而酶促反应不是。此外,二者还有以下区别:
(1)酶促反应由于其专一性,没有或少有副产物,有利于提取操作,对于微生物反应而言,基质不可能全部转化为目的产物,副产物的产生不可避免,给后期的提取和精制带来困难,这正是造成目前发
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