第三章生物信息的传递(上)——转录.pptx

第三章 生物信息的传递（上） ——从DNA到RNA; 在遗传学上，把遗传信息的流动方向叫做信息流。信息流的方向可以用科学家克里克提出的“中心法则”来表示。从“中心法则”可以看出，遗传信息的一般流动方向是：遗传信息可以从DNA流向DNA，即完成DNA的自我复制过程，也可以从DNA流向RNA，进而流向蛋白质，即完成遗传信息的转录和翻译过程。 1970年，巴尔的摩和梯明在致癌的RNA病毒中，发现一种酶，能以RNA为模板合成DNA。他们称这种酶为依赖RNA的DNA多聚酶，现在一般称为逆转录酶。这就是说，遗传信息流也可以反过来，从RNA→DNA。这是一项重要的发现。巴尔的摩和梯明于1975年荣获诺贝尔奖。 ;中心法则;● 基本概念 ● 转录起始： RNA聚合酶、启动子 ● 转录的基本过程 ● 转录后加工 ● 原核生物与真核生物mRNA的特征比较 ● RNA合成与DNA合成异同点 ;一、基本概念;参与转录的物质;转录的不对称性：;;转录单元（transcription unit） ;比较转录与DNA复制的异同 ;● 基本概念 ● 转录起始： RNA聚合酶、启动子 ● 转录的基本过程 ● 转录机器的主要成分 ● 原核生物与真核生物mRNA的特征比较 ● 终止和抗终止 ● 内含子的剪接、编辑、再编码及化学修饰 ● RNA合成与DNA合成异同点 ;二、参与转录起始的关键酶与元件;;目前已发现了至少4种?因子。;在细菌受到外界环境的急剧影响时，会改变所表达的基因，产生?因子更替的现象。如环境温度升高时，大肠杆菌会开启rpoH基因的表达， 其产物?32能识别热激基因的启动子，而正常状态下表达的基因会关闭或表达水平下降。 芽孢菌生活周期过程中生活方式的改变也是通过?因子的更替完成的。;;;大肠杆菌RNA聚合酶的组成分析 ;?亚基可能参与全酶的组装及全酶识别启动子。另外， ?亚基还参与RNA聚合酶与一些转录调控因子间的作用。 ?亚基具有与底物（NTP及新生的RNA链）结合的能力。利福霉素可以阻断转录的起始，链霉溶菌素可抑制延伸反应，二者均是通过与?亚基的结合而发挥作用的。;?’亚基可能与模板结合。 肝素可与?’亚基结合而抑制转录，并且可以和?’亚基竞争DNA的结合位点。 肝素是一种抗凝剂，由二中多糖交替而成的多聚体，在体内外都有抗凝作用。临床上主要用于血栓栓塞、心肌梗死、心血管手术，血液透析等等。 ?亚基和?’亚基提供了RNA聚合酶的活性中心，其一级结构与真核生物RNA聚合酶大亚基有同源性。 ?亚基的功能是帮助全酶识别启动子并与之结合。 ?亚基也可被看作一种辅助因子，因此又可称为?因子（ sigma factor）。;;● 真核生物RNA聚合酶;RNA聚合酶Ⅰ位于核仁，活性所占比例最大，负责rRNA（5.8S、18S和28S）的转录。 RNA聚合酶Ⅰ负责了大部分细胞RNA的转录。 (S为沉降系数，是某种颗粒在超速离心时沉降速度的数值，此数值与颗粒的大小直接成比例) RNA聚合酶Ⅱ位于核质，活性所占比例仅次于RNA聚合酶Ⅰ，主要负责核内不均一RNA(heterogenous nuclear RNA, hnRNA/ mRNA前体）的转录。 RNA聚合酶Ⅲ也位于核质，活性所占比例最小，负责tRNA、5SRNA、Alu序列和其他小RNA的转录。;;RNA聚合酶与DNA聚合酶的区别;转录复合物;（二） 启动子(promoter);● 原核生物启动子结构;大肠杆菌中部分启动子; ; ;大肠杆菌RNA聚合酶全酶所识别的启动子区;原核启动子区的经典结构;;1 sextama box(-35区)：RNA聚合酶识别位点，该序列提供了RNA聚合酶识别的信号。 σ亚基识别-35序列，为转录选择模板。这一序列的核苷酸结构在很大程度上决定了启动子的强度。 2 Pribnow box（-10区）： RNA聚合酶牢固结合位点，此处AT含量多，有助于DNA局部双链解开。是使起始复合物由关闭状态转变成启动状态的特定序列 此外，在启动子上游部位还有一个代谢分解物基因激活蛋白 （catabolitic gene activation protein ,CAP）结合位点。CAP是生物基因表达的一种正调节蛋白，当它与cAMP形成复合物后，能改变构象，提高对启动子的亲和力，促进转录进行。; -10区序列对转录的效率影响: TATAAT→AATAAT，转录效率下降,称为下降突变（down mutation）。 TATGTT→TATATT，转录效率上升，为上升突变（up mutation）。 以上突变为何会影响转录效率？ 碱基的改变可能导致DNA双链的双螺旋发生改变，最终导致酶与DN