四肢动物肢体的发育.ppt

极性决定区(zone of polarizing activity, ZPA)位于后部间质细胞区 将额外的ZPA移植到肢芽的前端可导致远端形成镜像对称结构 Sonic Hedgehog的表达部位与ZPA吻合 Sonic Hedgehog具有ZPA活性的实验证据 ZPA活性决定A－P轴线的信号传导机制 第二种模型的证据：SHH可诱导BMP2的产生，BMP2再诱导其它因子的合成。 SHH的下游基因是Hoxd基因 AER中的信号分子对于激活和维持SHH的表达起重要作用 AER中的FGF8不能诱导前部合成SHH，可能与Hoxb8的表达有关 四、肢体D－V轴线的确定 在背部外胚层特异性表达的Wnt-7a诱导背部间质细胞合成转录因子Lmx-1，后者再控制肢芽背部特异性基因的表达。Lmx-1在背、腹间质细胞中都表达，导致双被部结构。 Engrailed在小鼠肢芽腹部外胚层表达，其突变体的肢芽腹部外胚层可表达Wnt-7a，从而形成双背部结构。 敲除Wnt-7a的小鼠的脚掌有镜像对称的双腹部结构 敲除Wnt-7a的小鼠的脚掌缺少后部趾，说明其也影响A－P极性 前肢芽和后肢芽的成软骨细胞对信号因子的反应及纤粘连蛋白的沉积方式不同 五、前肢和后肢发育机制有所不同 Tbx5和Tbx4分别指定了前肢芽和后肢芽的发育 人的Holt-Oram Syndrome表现为心脏和手的畸形，而脚是正常的，其TBX5基因发生了突变 FGF诱导的肢体类型决定于肢芽是表达Tbx5或Tbx4 Tbx4的异位表达可改变FGF的诱导结果。 六、细胞凋亡与趾的形成 两栖类动物的趾的形成依赖于趾区和趾间区生长速度的差异 决定细胞死亡的是间质细胞，而不是外胚层细胞。 在早期肢芽中，BMP2、BMP4、BMP7在趾间组织中表达，促进趾间组织的凋亡，趾区表达的noggin可拮抗BMP。 但在较后期的肢体中，BMP促进间质细胞分化为软骨。 骨形成蛋白BMP2、BMP7、GDF5在关节形成中的作用 在noggin-/-小鼠胚胎中，BMP7使所有间质细胞转变为软骨细胞，导致无趾关节；含GDF5突变的人无趾关节，GDF5和BMP2的作用可能是杀死关节间的间质细胞或使其快速分化。 BMP7 BMP2 GDF5 七、肢体的进化 3.6－4亿年前泥盆纪的四肢动物的肢体近端结构与鱼鳍相似 在鱼鳍和鸡后肢中Hox基因的表达谱相似 不同物种的肢体骨结构是相似的 决定肢体轴线的分子机制在不同物种上是保守的 THE END Developmental Biology 第五章 四肢动物肢体的发育 肢体的三个轴线 肱骨 尺骨 桡骨 腕骨 脊椎动物肢体在结构和发育上是保守的。 一、肢芽的形成 肢体区(limb field): 由有能力形成一个肢体的中胚层细胞所组成的区域。 肢体区细胞的特点：可调节性。 寄生虫卵在肢芽中的繁殖导致多肢体的形成。 肢芽在躯干上的形成部位可能受视黄酸和hox基因的控制 如多种动物的前肢芽都出现于Hoxc-6表达谱的最前部边界，即第一胸椎所处位置。 肢体细胞的来源肌肉细胞前体：来源于体节的轴下生肌区；骨细胞前体：侧板中胚层的体细胞区间质细胞。 肢芽的形成受来自于中间中胚层(intermediate mesoderm)如肾前体的信号诱导，移去中肾或在中肾与肢芽细胞间插入不透膜可使肢芽停止增大。 新的研究表明，侧板中胚层中将要产生肢体间质细胞的细胞分泌的FGF10诱导了肢芽的形成。 顶端外胚层嵴(apical ectodermal ridge, AER)的形成 AER：中胚层间质细胞诱导其外侧的外胚层细胞形成突起结构，位于肢芽的远端边缘背腹交界处，是肢体生长的主要信号中心。 AER的作用： 1. 维持其内侧的间质细胞的增生 能力，使肢体沿Proximal－  Distal轴线生长。2. 维持A－P轴线控制因子的表 达。3. 与控制A－P和D－V轴线的因 子互作，以指导细胞的分化。 AER的形成依赖于背部外胚层和腹部外胚层的互作 证据：①将一个肢芽的腹部外胚层细胞移植到另一肢芽的背部外胚层中，将产生一个额外的AER；②在肢芽外胚层背部化的突变体上，因缺少腹部外胚层而不能生成AER，造成无肢体。 AER中FGF8的表达是肢体生长所必需的 肢芽形成中的分子互作模型 AER在肢芽沿P－D轴线生长中的作用 说明AER是维持间质细胞分裂、推动肢体向外生长所必需的 说明AER影响A-P轴线 说明间质细胞决定了肢体的类型 说明间质细胞是维持AER所必需的 二、肢体近－远端