中华绒螯蟹配套系育种群体与野生群体的遗传比较与选择压力分析资料.doc

DOI: 10.3724/SP.J.1118.2015.14282 中华绒螯蟹配套系育种群体与野生群体的遗传比较与选择压力分析吴廉1, 慈元吉1, 黄姝1, 茅海成1, 王中清1, 2, 王成辉1 201306; 2. 上海农场水产养殖场江苏 大丰 224151利用10个微卫星分子标记, 对中华绒螯蟹Eriocheir sinensis)配套系育种群体(A、B选育系F4群体及其正反杂交子一代AB、BA群体)和长江口野生群体(YZ)的遗传变异与差异进行了检测。结果表明: (1)配套系育种群体, 正反杂交群体的遗传多样性高于两亲本群体, 但配套系育种群体的遗传多样性均低于野生群体。(2)分子方差分析(AMOVA)、基于Nei’s遗传距离构建的树、主成分分析(PCA)以及STRUCTURE遗传聚类分析均一致显示, 正交群体AB与其母本为一组、反交群体BA与其母本BB为一组, 野生群体YZ单独为一组, 三组间的遗传差异极显著(P0.01)。(3)应用Arlequin软件和Bayscan软件进行选择压力检测, 发现配套系育种群体中有 3个位点、野生群体中有1个位点受到了显著的正向选择压力, 揭示连续的人工选择在一定程度上促进了配套系育种群体与野生群体间的遗传分化。综合研究表明, 人工选择作用促进了配套系育种群体与野生群体的遗传分化并导致了育种群体的遗传多样性下降, 而配套系育种技术可在一定程度上增加配套子代的遗传多样性。中华绒螯蟹; 微卫星位点; 遗传变异; 选择压力中图分类号: S917 文献标志码: A 文章编号: 1005(8737((2015)02(0204(10 人工育种群体与野生群体的遗传差异是生物种质资源保护和利用研究中的核心问题之一。育种群体由于受奠基者效应、人工有目的选择和遗传漂变等因素影响, 其遗传多样性会随选育进程而逐渐下降, 会与野生群体存在较大的遗传差异并可能给野生群体带来不同程度的负面影响[1–3]。因而, 了解育种群体的遗传变异和遗传背景, 维持育种群体合理的遗传多样性, 对于水产生物的连续世代选育与遗传改良非常重要。 中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis), 俗称河蟹, 是国重要的水产经济生物。近些年来, 河蟹市场需求旺盛, 养殖产量不断提高, 2012年全国河蟹产量已达71.44万[4], 堪称国名特优水产养殖业的一朵奇葩。然而, 支撑中国如此巨大产量的河蟹种源基本上是未经遗传改良的野生群体。自2011年以来, 中国虽然选育出个中华绒螯蟹良种, 并经全国水产原种和良种审定委员会审定通过但与其庞大的产业规模与巨大的苗种需求相比, 中华绒螯蟹的良种数量实在太, 良种的贡献仍然。 自2004年以来, 实验室开展了中华绒螯蟹的良种选育, 采用配套系育种的技术路线, 构建了3个不同选育目标性状的配套选育系(AB系: 以额齿形态和生长速度为选育目标; C系)。这3个选育系均以长江干流(南京江段)中的野生亲蟹为奠基群体, 每代应用群体选育方法对3个选育系分别进行平行选育, 化各选育系的基因型。当各系选育至第代(F4时, 首先开展了A、B系间的双列杂交, 筛选性状优良的配套系。因而, 本与先前有关作者对中华绒螯蟹养殖、选育群体与野生群体的遗传比较研究不同[–7], 拟以中华绒螯蟹配套系育种群体(两个配套亲本及其正反杂交子一代)为材料, 长江野生群体为参照, 利用微卫星分子标记技术, 分析它们的群体内遗传结构和群体间遗传差异, 其目的是: (1)比较配套系育种群体与野生群体的遗传差异, 探讨育种群体的遗传多样性维持方式; (2)了解双亲对配套组合的遗传传递关系; (3)探讨人工选择压力对配套系育种群体的作用和影响。 1.1 样本采集 2012年12月, 取本实验室的中华绒螯蟹配套选育系第代(F4)的2个亲本群体A系(A♀×A♂, 简称AA)和B系(B♀×B♂, 简称BB), 以及其正反杂交子一代群体AB(A♀×B♂)和BA(B♀×A♂)的成蟹, 雄蟹体重150~280 g, 雌蟹体重130~180 g, 其中AA、BB群体各50只、BA群体71只、AB群体24只。野生群体(简称YZ)2012年12月采集于长江口九段沙水域的长江水系洄游亲蟹, 雄蟹体重60~180 g, 雌蟹体重50~110 g, 共50只。所有样本在测量外部形态特征后, 取第二步足肌肉组织于95%乙醇中保存备用。 1.2 DNA提取与PCR扩增 基因组DNA提取采用饱和氯化钠法[]。筛选已报道[–10]的10对微卫星引物(编号A9、B3、CHX23、CHX24、CHX26、CHX29、ES17、ES29、ES30、Esin18、Esin87)由上海生工生物工程服务有限公司合成后, 对所有样本进行PCR扩