快速筛选一抗二抗原则介绍.pptxVIP

一抗、二抗的选择;;;抗原基础知识概述;抗原基础知识概述;;抗体是机体免疫细胞被抗原激活后，由分化成熟的终末B细胞识别抗原后增殖分化为浆细胞所产生的一种蛋白质，主要存在于血清等体液中，能与相应抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 打个比方：抗体是对付抗原的防御力量。因为有侵略者的入侵，才有抵抗侵略者的防御力量。 免疫球蛋白（Ig），可分为分泌型（sIg）和膜结合型（mIg）两类， 抗体都是免疫球蛋白（Ig），并非所有免疫球蛋白都具有抗体活性。;抗体的结构 Ig 分子的基本结构是由四肽链组成的。即：由二条相同的分子量较小的肽链(轻链) 和二条相同的分子量较大的肽链(重链) 组成。 轻链与重链是由二硫键连接形成一个四肽链分子称为 Ig 分子的单体；单体是构成所有免疫球蛋白分子的基本结构；所有抗体 的单体都是四条肽链的对称结构???即：两条糖基化重链(H) 和两条非糖基化轻链(L) ；每条重链和轻链分为氨基端(N 端) 和羧基端(C 端) 。;;依据免疫球蛋白的重链，可分为 5 类， μ 、 γ 、 α 、 δ 、 ε 链，五类免疫球蛋白分别称为： IgM， IgG， IgA， IgD 和 IgE。;;;一抗的选择;一抗的选择;一抗的选择;3、样本的种属 应选择物种相同或有交叉反应的抗体，抗体可能与不同物种的同种靶蛋白有交叉反应，因其氨基酸序列同源性较高，如果样本的种类未列入抗体说明书上的交叉反应种属表中，并不意味着该抗体不适用于检测该物种的蛋白，而只是表示该物种尚未用此抗体检测验证过，应通过序列比对的方法来预测交叉反应，可应用NCBI?BLAST来进行不同物种蛋白同源性比对。;一抗的选择;一抗的选择; ??? ;;二抗的选择;二抗的选择;二抗的选择;二抗的选择;;常见抗体供应商： Abcam , 网址链接： / Santa Cruz,网址链接： /en/us CST,网址链接： / 武汉博士德，网址链接： / 武汉三鹰，网址链接： / ;Abcam中搜索GAPDH界面截图;武汉三鹰中搜索TNF-a 界面截图