丛枝菌根与无糖培养对海棠组培苗生理效应研究.pdfVIP

摘 要 植物组织培养是一项能获得大量同品质种苗的快速繁育技术，具有其它育占方式无法比拟的 优势，已成为植物良种繁育的重要手段。论文针对常规组织培养生长环境差、易污染、种苗玻璃 化、驯化周期长等实际问题，以及植物无糖组培C02控制精度低、湿度难以控制、促苗手段缺乏 等技术难题，从大型培养容器的设计、环境的精确控制、无糖暴露培养模式、PPFD与C02浓度 相关性以及菌根促苗等关键技术入手，创建了以大型培养容器为核心的高品质种苗无糖培养技术 体系。本研究主要内容与成果如下： 1．研制了装有新型C02施放装置的180L大型培养容器及其环境控制系统，通过对培养容器的 改进，使操作更容易；同时，更大的垂直空间，提高了培养容器内气体浓度的缓冲性能；C02 施放装置的设计与安装，为提高C02施放时的控制精度创造了条件；采用小流量控制、三通 阀调节和PWM控制方式，实现对C02浓度的精确控制，控制精度达到±50pmol·mol1；采 用覆膜技术和气体循环吸附除湿相结合的方式实现了对容器内相对湿度的自动控制，控制精 度达到-I-2％。 2．采用自行设计的无糖培养容器和环境控制系统，建立了穴盘覆膜暴露培养新模式，改进了传 统的密闭式小容器培养方法，实现了组培苗开放式培养，摆脱了许多传统组织培养的束缚， 省略了组培苗驯化阶段。建立了新的技术体系，采用该模式培养的组培苗光合能力强、根系 发达，植株的干物质积累多，组培苗生长均匀，品质高。 3．研究了PPFD与C02相互作用对组培苗光合作用的影响，明确了组培环境应处于适当的高C02 浓度和与之相匹配的高PPFD，以使组培苗高效利用光能，促进组培苗的生长。 4．建立了生根阶段接种菌根真菌提高组培苗品质的方法。在生根阶段接种^ll真菌，形成平衡的 根际生物环境，促进了组培苗的生长发育。主要表现为：减少叶片的气孔阻力、增加叶绿素 含量和C02的固定，提高寄主植物的光合速率，改善植株的生理状况及品质；而且，形成的 菌根真菌一组培苗共生关系在移栽后仍然存在，并减轻了移栽对海棠组培苗造成的胁迫，缩 短海棠组培茸的休眠时间7天。 5．研究并确立了在离体条件下建立丛枝菌根一组培苗共生体关键技术措施： (1)降低培养基中营养离子浓度。对于圆叶海棠组培苗研究采用无激素无糖的I／4MS培养基， 降低了培养基矿质离子浓度，为有益微生物生长提供一个低渗透压的生存环境。 (2)选择侵染率高效的菌株。本研究筛选了Gv菌根接种圆叶海棠组培苗能够提高组培苗的品 质。 (3)适宜的接种量，本研究筛选了菌根接种圆叶海棠组培苗接种量为5 g·pot1的为最好。 (4)增加光照度和C02浓度能够提高组培苗的光合作用，促进组培苗光合产物的积累，减轻 菌根真菌初期侵染寄主植物时的副作用。 关键词：丛枝卣根真菌，无糖培养，海棠组培苗，环境调控，光合速率 Abstract Planttissuecullareisawidely has over identical conventional genetically many planflets．It advantages propagationtechniques,mad hasbeen toan nx∞sof this tothe of developedimportant problems plandetpropagation．Inpaper,due theconventionaltissue as：the vulnerable culture，such growthenvironment,the