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(3)举例:大肠杆菌的一种限制酶能识别GAATTC序列,并在G和A之间切开。 (5)作用结果:形成DNA片段末端 ①平末端:平切(相同部位) ②黏性末端:错位切(不同部位) 2、基因的针线──DNA连接酶 (1)连接的部位:DNA双链片段间的 磷酸二酯键,不是氢键。 (2)常用种类: ①E.coliDNA连接酶: 3.种类:质粒、噬菌体和动植物病毒。 运载体 ①基因文库:储存某种生物基因的菌群的总称,不是指生物基因。 ②基因组文库:某个含有所有基因的受体菌。指某个个体。 ③部分基因文库(cDNA文库):某个含有部分基因的受体菌。 ④基因库:一个种群所有基因的总称,指基因。 4)目的基因的扩增:PCR技术 ①原理:DNA复制 ②结果:目的基因成指数增长 ③步骤:变性(解旋为单链)+引物,退火,延伸(DNA聚合酶作用),多次重复 ④原料:DNA模板、4种脱氧核苷酸、引物、DNA聚合酶、ATP ⑤复制方向:只能从5’端向3’端延伸 原因:DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,而只能从3’端延伸DNA链。 四 蛋白质工程的崛起 蛋白质工程的概念 是研究蛋白质的结构及结构与功能的关系,然后人为地设计一个新蛋白质,并按这个虚构的蛋白质结构去改变其基因结构,从而产生真实的新蛋白质。 或者从蛋白质结构与功能的关系出发,定向地改造天然蛋白质的结构,特别是对功能基因的修饰,也可以制造新型的蛋白质。 一、蛋白质的改造 干扰素在体外保存困难 玉米中赖氨酸含量比较低 二、蛋白质工程的基本原理 蛋白质工程的途径 蛋白质工程操作程序的基本思路与基因工程的不同 基因工程是遵循中心法则, 从DNA→mRNA→蛋白质→折叠产生功能, 生产出自然界已有的蛋白质。 蛋白质工程是:确定蛋白质的功能→蛋白质应有的高级结构→蛋白质应具备的折叠状态→应有的氨基酸序列→应有的碱基排列, 创造自然界不存在的蛋白质。 蛋白质工程的进展和前景 1、蛋白质工程的诞生是有其理论与技术条件的,它是随着分子生物学、晶体学以及计算机技术的发展而诞生的,与基因组学、蛋白质组学、生物信息学的发展等因素有关 2、现状:成功的例子不多,主要是因为蛋白质发挥其功能需要依赖于正确的空间结构,而科学家目前对大多数蛋白质的空间结构了解很少。 酶工程简介 酶工程就是指将酶所具有的生物催化作用,借助工程学的手段,应用于生产、生活、医疗诊断和环境保护等方面的一门科学技术。由酶制剂的生产和应用两方面组成的。 5、干扰素是治疗癌症的重要物质,人血液中每升只能提取0.05μg干扰素,因而价格昂贵,平民百姓用不起。但美国有一家公司用遗传工程方法合成了价格低廉、药性一样的干扰素,其具体做法是: (1)从人的淋巴细胞中提取能指导干扰素合成的_______,并使之与一种叫做质粒的DNA结合,然后移植到酵母菌内,从而用酵母菌来_________。 (2)酵母菌能用__________方式繁殖,速度很快,所以,能在较短的时间内大量生产 。利用这种方法不仅产量高,并且成本也较低。 (2008上海高考生物巻)以重组DNA技术为核心的基因工程正在改变着人类的生活。请回答下列问题。 (1)获得目的基因的方法通常包括 和 。 (2)切割和连接DNA分子所使用的酶分别是 和 。 (3)运送目的基因进入受体细胞的载体一般选用病毒或 ,后者的形状成 。 (4)由于重组DNA分子成功导入受体细胞的频率 ,所以在转化后通常需要进行 操作。 (5)将人胰岛素基因分别导入大肠杆菌与酵母菌,从两者中生产的胰岛素在功能和 序列上是相同的。 (2007,山东理,8分)继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后,膀胱生物反应器的研究也取得了一定进展。最近,科学家培育出一种转基因小鼠,其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。请回答: (1)将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞,常用方法是 。 (2)进行基因转移时,通常要将外源基因转入 中,原因是 。 (3)通常采用 技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组。 (4)在研制膀胱生物反应器时,应使外源基因在小鼠的 细胞中特异表达。 (5)为使外源基因在后代长期保持,可将转基因小鼠
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