分离与纯化详解.pptVIP

第九节 蛋白质 的分离与纯化 四、层析技术 层析法也称色谱法，是1906年俄国植物学家Michael Tswett发现并命名的。他将植物叶子的色素通过装填有吸附剂的柱子，各种色素以不同的速率流动后形成不同的色带而被分开，由此得名为“色谱法”（Chromatography) 。 后来无色物质也可利用吸附柱层析分离。 1944年出现纸层析。 以后层析法不断发展，相继出现气相层析、高压液相层析、薄层层析、亲和层析、凝胶层析等。 （一）层析的分类 按层析的分离机理分类 排阻层析(exclusion chromatography) 离子交换层析(ion exchange chromatography) 吸附层析(absorption chromatography) 分配层析(partition chromatography) 亲和层析(affinity chromatography) 金属螯合层析(metal chelating chromatography) 疏水层析(hydrophobic chromatography) 反向层析(reverse phase chromatography) 聚焦层析(focusing chromatography) 灌注层析(perfusion chromatography) （二）排阻层析 （凝胶层析） 凡是利用生物大分子的相对分子质量差异进行层析分离