季花药培养上课用总结.ppt

花粉粒 4、四分体： 减数分裂中四分体：联会后一对同源染色体中含有四条姐妹染色单体。 小孢子细胞四分体期：花粉母细胞经减数分裂形成的4个连在一起的单倍体细胞 为什么把胚状体到丛芽的 过程称为分化，而把从愈伤组织到丛芽的过程成为再分化？ 胚状体的结构及其发育过程与种子相似，所以把胚状体到丛芽的过程称为分化 从愈伤组织到丛芽的过程成为再分化 体细胞胚（胚状体）： 在组织培养过程中，某些体细胞在形态上转变为与合子发育成的胚非常相似的结构，发育过程亦与合子胚类似，被称为体细胞胚（胚状体）。 * 花药和花粉培养：指在合成培养基上，改变花粉的发育途径，使其不形成配子，而像体细胞一样进行分裂、分化、最终发育成完整植株。该发育途径被称为“花粉孢子体发育途径”或“雄核发育”。 两者的异同点 培养目的相同，均获得小孢子植株。 花药培养属于器官培养；而花粉培养属于细胞培养。 花粉培养没有药壁组织干扰；可计数小孢子产胚率；可观察雄核发育的全过程；单倍体产量高。但技术更复杂 * ①二核花粉粒：成熟的花粉粒中，只含花粉管细胞核和生殖细胞核。（精子在花粉管中形成） ②三核花粉粒：有些植物的花粉，在成熟前，生殖细胞进行一次有丝分裂，形成两个精子，这样的花粉在成熟时，含有一个营养核和两个精子。 * 注：花粉细胞核内有染色体，染色体主要由DNA和蛋白质组成，醋酸洋红为碱性染色剂，染色体容易被染色。通过染色，可以确定细胞核为单核期还是双核期，是单核居中期还是单核靠边期。一般单核靠边期的花药培养成功率最高。 花的结构 雌蕊 的结构 植物的花药培养在育种上有什么意义？ 花粉粒（1N） 单倍体植株（1N） 二倍体纯合子植株（2N） 缩短了育种周期后代为纯合子 花丝 花药：囊状结构，内有很多花粉 2、由花粉母细胞（即小孢子母细胞） 花粉， 即：单倍体的生殖细胞。 3、阶段：四分体时期、单核期、双核期 （一）被子植物的花粉发育 1、雄蕊 一、基础知识 减数分裂 4、过程： 减数分裂 有丝分裂 1花粉母细胞（2n） 4个小孢子(小孢子四分体)（n） 减分 有分 1个花粉管细胞核（n） 1个生殖细胞核（n） 有分 2个精子 单核居中期（n） 单核靠边期（n） 4、过程： 即4个单倍体细胞 说明： 1、二核花粉粒：有些成熟的花粉粒中，只含花粉管细胞核和生殖细胞核。（精子在花粉管萌发时形成，最终也有三个细胞核） 2、三核花粉粒：有些植物的花粉，在成熟前，生殖细胞进行一次有丝分裂，形成两个精子，这样的花粉在成熟时，含有一个营养核和两个精子。（两个精子和一个营养核的基因型相同。） 3、 4个小孢子 减数分裂 有丝分裂 4个花粉管细胞核 4个生殖细胞核 有丝分裂 8个精子 1个花粉母细胞 （二）、产生花粉植株的两种途径 花粉 花粉 胚状体 愈伤组织 丛芽 生根 移栽 脱分化 分化 再分化 诱导 脱分化 说明：两种途径之间并没有绝对的界限，主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比。 部分花药通过胚状体途径形成小植株 烟草花药培养 胚状体发育途径 愈伤组织转接种到再生培养基 愈伤组织分化形成再生植株 水稻花药培养 愈伤组织发育途径 部分花药产生愈伤组织 接种在平板上的水稻花药 1、材料的选择： ⑴不同种类植物的诱导成功率不同。 ⑵同一种植物，亲本植株的生理状况对诱导成功率有直接影响。花期早期－初花期 （3)选择最合适的花粉发育时期 单核靠边期 ①不选择单核期之前花药原因：花药质地幼嫩，容易破碎； ②不选择单核期之后花药原因：花瓣开始松动，给材料消毒带来困难困难； ③挑选单核期花药方法：应当选择完全未开放的花蕾，菌少，易消毒。 （三）影响花药培养的因素 五月初至中旬 2、培养基的组成 花药培养所采用的培养基各成分中植物生长调节剂的水平和配比起决定作用。 ⑴诱导愈伤组织或胚状体产生的培养基：广泛使用2，4-D、IAA和KT； ⑵诱导分化的培养基常除去2，4-D而以IBA或BA等代之。 3、其他因素： 亲本植株的生长条件、材料的低温预处理、接种密度、培养的环境条件等对诱导的成功率都有一定的影响。 为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？ 答：花瓣松动后，微生物就可能侵入到花药，给材料的消毒带来困难。 二、实验操作 材料选取 材料和 消毒 接种和 培养 （一）材料选取 2、通过镜检来确定是否处于适宜的发育期。 最常用的方法：醋酸洋红法 某些植物的花粉细胞核不易着色:焙花青-铬矾法，花粉细胞核染成蓝黑色。 1、从花药看：月季的初花期 从花粉看：单核期靠边期 从花蕾看：完全未开放的 鉴定花粉： ①最常用