季花药培养总结.ppt

知识回顾 花药离体培养的理论基础是什么？ （一） 被子植物的花粉发育 8 9 实验操作 一、材料的选取 二、材料的消毒 三、接种和培养 四、鉴定和筛选 （一） 被子植物的花粉发育 （二）材料的消毒 5、无菌水冲洗3～5次 花药的外面有花萼、花瓣保护，通常处于无菌状态 （三）接种和培养 1 消毒后花蕾，要在 下除去萼片和花瓣，并立即将花药接种到培养基上。 无菌技术是否过关 如果出现了污染现象，说明某些操作步骤，如培养基灭菌、花蕾消毒或接种等有问题。 结果分析与评价 接种是否成功 如果接种的花药长出愈伤组织或释放出胚状体，花药培养的第一步就成功了。要适时转换培养基（转移到分化培养基），以便愈伤组织或胚状体进一步分化成再生植株。 结果分析与评价 练习：小麦高杆（D）对矮杆（d）为显性，抗锈病（T）对不抗锈病（t）为显性，现有高杆抗锈病和矮杆不抗病的两种纯合体，要获得矮杆抗锈病的良种，可用杂交育种和单倍体育种法，步骤如下： 高杆抗锈病（DDTT） × 矮秆不抗锈病 （ddtt） F1： 的基因型和表现型 a ↓ 各种配子的种类 a ↓(__________) 符合要求的单倍体的基因型_____________ ↓(_______________) 良种的基因型表现型 _________________ 单倍体育种方法的主要优点是 ___ __________ 。 可以明显缩短育种年限 ↓（__________ ） P： DdTt，高秆抗锈病 DT， Dt, dT, dt ddTT 矮秆锈病 杂交 花药离体培养 dT 秋水仙素处理 减数分裂 细胞生长 小孢子母细胞 或花粉母细胞 2N 4个小孢子N 四分体时期 1个小孢子N 单核居中期 单核靠边期N 单核花粉粒 有丝分裂 有丝分裂 精子（花粉或花粉细胞） 营养细胞核 双核花粉粒N×2 三核花粉粒N×3 三、影响花药培养的因素 1、材料的选择： 2、培养基的组成：培养基的组成会影响脱分化与再分化 3、其他影响因素： 如亲本的生长条件、材料的低温预处理以及接种密度对诱导成功率都有影响。 ①植物类型 ②植株的生理状况：花期早期的花药反应能力较好 ③花粉发育时期：一般而言单核后期花药对培养反应较好 选材是否成功是花药培养成功的关键 （三）影响花药培养的因素 ①不同植物的诱导成功率很不相同； ②同一种植物的生理状况对诱导成功率也有直接影响： ③花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉植株。 一般月季的花药培养时间选在5月初到5月中旬，即月季的初花期。 选择合适的花粉发育时期是提高诱导成功率的重要因素。 （1）选材 1、材料的选择： （2）花药培养时期的选择： 合适的花粉发育时期是提高诱导成功率的重要因素 ①原因：因为并不是任何时期的花粉都可以经过培养产生愈伤组织或胚状体，花粉发育的过程中，只有某一个时期对离体刺激敏感。 （三）影响花药培养的因素 一般来说，在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养的成功率最高。即：最适合花药培养的小孢子发育时期为单核靠边期。 ②花药时期选择： 单核靠边期 1、材料的选择： （1）选材 选择单核期以前的花药接种，质地幼嫩，极易破碎； 选择单核期之后的花药接种，花瓣已有些松动，又给材料的消毒困难。 ③其它时期选择的缺点 ④单核期花药的挑选：通常选择完全未开放的花蕾。 ⑤选择完全未开放花蕾的原因： 花瓣松动后，微生物就可能侵入到花药给材料的消毒带来困难。 旁栏思考：为什么花瓣松动会给消毒带来困难？