分子荧光光谱法解说.pptVIP

原子光谱法是由原子外层或内层电子 能级的变化产生的，它的表现形式为线光谱。属于这类分析方法的有原子发射光谱法（AES）、原子吸收光谱法（AAS），原子荧光光谱法（AFS）以及X射线荧光光谱法（XFS）等。 分子光谱法是由 分子中电子能级、振动和转动能级 的变化产生的，表现形式为带光谱。属于这类分析方法的有:紫外-可见分光光度法（UV-Vis），红外光谱法（IR），分子荧光光谱法（MFS）和分子磷光光谱法（MPS）等。 原理 物质在吸收光的过程中，光子的能量传递给了物质分子。分子被激发后，发生了电子从较低能级到较高能级的跃迁。而处于激发态的分子不稳定，他可能通过辐射跃迁和非辐射跃迁的衰变过程返回基态。 辐射跃迁的衰变 非辐射跃迁的衰变 分子荧光光谱法 molecular fluorescence analysis 概述/ 01 荧光分析基本原理/ 02 荧光分析仪器 / 03 对比与发展 / 05 检测结果与分析/ 04 CONTENTS Part 01 概述 overview 光谱法 基于物质与辐射能作用时，测量由物质内部发生量子化的能级之间的跃迁 而产生的发射、吸收或散射辐射的波长和强度进行分析的方法。 主要研究内容 The Main Contents Of The Research 分子光谱法 原子光谱法 Part 02 荧光分析的基本原理 fundamental of molecular fluorescence { 荧光 磷光 { 振动松弛 外转换 系间窜越 单重态：分子中全部电子都是自旋配对的，即S=0，该分子处于单重态，用符号S表示。若分子吸收能量后在跃迁过程中不发生自旋方向的变化，这时分子处于激发的单重态。 三重态：当电子在跃迁过程中还伴随着自旋方向的改变，这时分子便具有两个自旋不配对的电子，即S=1，分子处于激发的三重态，用符号T表示。 S0 分子的基态 S1 第一电子激发单重态 S2 第二电子激发单重态 T1 第一电子激发三重态 T2 第二电子激发三重态 发光类型 Emitter type 荧光 磷光 由第一电子激发单重态所产生的辐射跃迁的衰变而伴随的发光现象。 由最低的电子激发三重态发生的辐射跃迁的衰变所伴随的发光现象。 01 振动松弛 VR 分子将多余的振动能量传递给介质而衰变到同一电子态的最低振动能级的过程。 02 内转化 ic 相同多重态的两个电子态间的非辐射跃迁过程（例如S1---S0，T2---T1） 03 系间窜越 isc 不同多重态的两个电子态间的非辐射跃迁过程（例如S1---T1，T1---S0） 非辐射跃迁的衰变 S2 S1 S0 T1 吸 收 发 射 荧 光 发 射 磷 光 系间跨越 内转换 振动弛豫 能 量 l 2 l 1 l 3 l ?2 T2 斯托克斯位移（ stoke位移） 在溶液的荧光光谱中，所观察到的荧光的 波长总是大于激发光的波长 激发态分子在发射荧光之前，很快经历了振动松弛或者内转化的过程损失了一部分激发能，致使发射向对于激发总是有一定的损失。 辐射跃迁只使激发态分子衰变到基态的不同振动能级，然后通过振动松弛进一步损失能量。 激发/吸收光谱 荧光光谱 磷光光谱 图2 萘的激发光谱I、荧光II和磷光光谱III 荧光与分子结构的关系 给电子基团，如-0H、-OR、-NH2、-CN、-NR2等，使荧光增强。 吸电子基团，如-COOH、 -C=O、-NO2、-NO、卤素离子等，会减弱甚至猝灭荧光。 取代基的影响 含有π→π＊跃迁能级的芳香族化合物的荧光最强芳环越大其荧光峰越移向长波长方向，且荧光长度往往比较强。 具有大的共轭π键的结构 化合物 ?F λex/nm λem/nm 苯 0.11 205 278 蒽 0.29 286 321 萘 0.46 365 400 丁省 0.60 390 480 戊省 0.52 580 640 具有刚性平面结构 荧光效率高的荧光体，其分子多是平面构型且具有一定的刚性 酚酞 荧光素 无荧光 氧桥 环境对荧光的影响 effect by environment 03 大多数含有酸性或碱性基团的芳香族化合物受PH值影响很大 溶剂与溶质分子存在静电相互作用，一般来说，溶剂的极性增强，荧光强度增大。 01 02 随着温度的降低溶液的荧光量子产率和荧光强度增大。 环境因素尤其是介质对分子荧光可能会产生强烈的影响 荧光淬灭 动态淬灭：淬灭剂与荧光物质的激发态分子之间的相互作用。 指任何可以使荧光强度降低的作用。 静态淬灭：淬灭剂与荧光物质的基态分子之间的相互作用。 Part 03 荧光