模块十一中药中强心苷类化学成份的提取分离技术资料.ppt

教学内容 学习提示 一、概述 强心苷(cardiac glycosides)是指生物界中一类对心脏有显著生理活性的甾体苷类。 强心苷能加强心肌收缩性，减慢窦性频率。主要用于治疗慢性心功能不全，心房纤颤、心房扑动、阵发性心动过速等心脏疾病。 强心苷还有兴奋延髓催吐化学感受区和影响中枢神经系统作用，可引起恶心、呕吐等胃肠反应，并能使动物产生眩晕、头痛等症。 蟾蜍 但强心苷类能兴奋延髓催吐化学感受区而引起恶心、呕吐等胃肠道反应；且有剧毒，若超过安全剂量时，可使心脏中毒而停止跳动。 其中某些强心苷对动物肿瘤有效，主要是细胞毒作用。 较重要的植物有黄花夹竹桃、紫花洋地黄、毛花洋地黄、杠柳、铃兰、海葱、福寿草、羊角拗等。 黄花夹竹桃 1. 6-去氧糖 （四）结构与强心作用的关系 （1）不饱和内酯环 C17-β-不饱和内酯环，若为α-构型或开环，强心作用很弱，甚至消失； 双键被饱和，强心作用下降，毒性亦下降； （2）甾体母核的立体结构 1）C/D环须为顺式构象，反式无强心活性； 2）C14具有β-OH，若为α型则无强心活性； 3）A/B环顺式的甲型强心苷元，C3-OH须是β-构型，α-构型无效；而A/B环反式的甲型强心苷元，则无此要求； 4）. C10-CH3氧化成羟甲基或醛基或羧酸后，可影响强心作用的强度或毒性，但不是决定因素。 5）. 引入5?、11?、12?- OH有增强活性作用，而引入1?、6?、16?- OH有降低活性作用。 如果羟基数越多，亲水性则越强，例如乌本苷（ouabain）虽是单糖苷，但整个分子却有八个羟基，水溶性大（1:75），难溶于氯仿；洋地黄毒苷虽为三糖苷，但整个分子只有五个羟基，故在水中溶解度小（1:100000），易溶于氯仿（1:40）。 苷元上的羟基如形成内氢键，则水溶性减小。 水解特点 用 途   蜗牛酶（一种混合酶，蜗牛肠管消化液经处理而得）几乎能水解所有的苷键，能将强心苷分子的糖逐步水解，直至获得苷元，常用来研究强心苷的结构。  1.醋酐-浓硫酸反应: 将样品溶于冰醋酸，加入醋酐-浓硫酸（20：1），反应液由红紫-蓝-绿-污绿，发生一系列颜色变化，最后褪色。 2.氯仿-浓硫酸反应:将样品溶于氯仿，加入硫酸，氯仿层显血红色或青色，硫酸层显绿色荧光。 4、三氯化锑或五氯化锑：纸片反应，样品斑点灰蓝、灰紫等颜色。 5、三氯醋酸反应：样品和25%的三氯醋酸的乙醇液反应，显红色至紫色。只有甲型强心苷显色。 三氯醋酸-氯胺T(chloramines T反应) 将试样醇溶液点在滤纸（或薄板）上，喷以三氯醋酸-氯胺T试剂（25%三氯醋酸乙醇溶液4 ml加3%氯胺T水溶液1ml混匀），待纸片干后，100℃加热数分钟，于紫外光下观察。洋地黄毒苷元衍生的苷类显黄色荧光；羟基洋地黄毒苷元衍生的苷类显亮蓝色荧光；异羟基洋地黄毒苷元衍生的苷类显灰蓝色荧光。该反应可初步区别洋地黄类的苷元。 1、Legal反应：取样品1～2mg，溶在2～3滴吡啶中，加1滴3%亚硝酰铁氰化钠和1滴氢氧化钠液，显深红色并逐渐褪去。 此反应机制可能是由于活性亚甲基与活性亚硝基缩合生成异亚硝酰衍生物的盐而呈色，凡分子中有活性亚甲基者均有此呈色反应。 1.?Keller-kiliani(K-K)反应 此反应是α-去氧糖(2-去氧糖）的特征反应，对游离的α-去氧糖或在反应条件下能水解出α-去氧糖的强心苷都可显色。 取样品1mg溶于5ml冰乙酸中，加一滴20%三氯化铁水溶液，倾斜试管，沿试管壁加入5ml浓硫酸，若有α-去氧糖存在，乙酸层渐呈蓝或蓝绿色。但若不显色，不能说明无α-去氧糖。 3.对-二甲氨基苯甲醛反应：样品反应后呈灰 红色斑点。 显色反应小结按作用部位分： 六、强心苷的色谱检识 强心苷的常用色谱检识方法有纸色谱、薄层色谱等。 （一）纸色谱 纸色谱常用于强心苷的检识。根据强心苷及其苷元的极性不同可选用不同的固定相。 如强心苷的亲水性较强，宜选用水为固定相，移动相多选用水饱和的丁酮、乙醇-甲苯-水（4∶6∶1）、氯仿-甲醇-水（10∶2∶5）； 如强心苷的亲水性较弱或检识苷元时，可选用甲酰胺为固定相，以甲酰胺饱和的甲苯或苯为移动相。 （二）薄层色谱 吸附薄层色谱 由于强心苷分子中含有较多的极性基团，尤其是多糖苷，在氧化铝上吸附作用较强，分离效果较差，因此常采用硅胶作吸附剂，以氯仿-甲醇-冰醋酸（85∶13∶2）、二氯甲烷-甲醇-甲酰胺（80∶19∶1）、醋酸乙酯-甲醇-水（8∶5∶5）等溶剂系统作为移动相。这些展开剂中含少量甲酰胺或水可以减少拖尾现象。 分