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角度二:微生物代谢在发酵工程的应用 【典例4】某同学尝试在适宜的条件下制作果酒和果醋,发酵装置如甲图所示,在消毒后的锥形瓶中装入新鲜的葡萄汁后封闭通气口,进行自然发酵。发酵初期将温度控制在18℃~25℃,可见溶液中有大量气泡产生;中期可以闻到酒香;后期接种醋酸菌,适当升高温度并通气,酒香逐渐变成醋香。分析并回答下列问题: (1)发酵开始时封闭通气口的原因是酵母菌____________。与醋酸菌相比较,酵母菌在细胞结构上最大的特点是______ _______________。 (2)接种醋酸菌,需升高温度到________,并且需要通气,这是因为醋酸菌为____________________。 (3)乙图中能表示整个发酵过程培养液pH变化的曲线是____ ____________。 (4)工业生产中可通过重离子束辐照啤酒酵母菌获得呼吸缺陷型酵母菌菌种来提高果酒的产量。 ①经过重离子束辐照后的酵母菌可以接种到TTC(一种显色剂)培养基中快速筛选,在此培养基中呼吸正常的酵母菌菌落呈红色,呼吸缺陷型酵母菌菌落呈白色,此培养基从用途上划分属于______培养基。选育此菌种的方法称为___________。 ②选育出的菌种需经多次________后才能接种到发酵罐中进行工业生产。 ③呼吸缺陷型酵母菌细胞内的丙酮酸可大量转化为酒精,说明其细胞代谢过程中______________________________被阻断,因此在啤酒工业生产中具有潜在的经济价值。 【标准解答】(1)因为酒精是酵母菌通过无氧呼吸产生的,所以在发酵开始时需要密封发酵装置,为酵母菌提供一个无氧环境。醋酸菌是原核生物,酵母菌是真核生物,二者的细胞结构主要区别在于有无以核膜为界限的细胞核。 (2)醋酸菌属于好氧细菌,新陈代谢的适宜温度为30℃~35℃。 (3)在果酒发酵阶段,由于产生CO2,所以酸碱度持续下降,但速度较慢。由于进入果醋发酵阶段后,直接产生酸性物质——醋酸,所以酸碱度下降速度较快,因此发酵过程中的酸碱度变化为曲线②。 (4)用重离子束辐照产生呼吸缺陷型酵母菌,这是利用了人工诱变的育种方法,筛选的方法是利用鉴别培养基,通过观察菌落的颜色获得所需菌种。选育出的菌种要经过扩大培养后才能用于工业生产。根据有氧呼吸和无氧呼吸的原理可知:呼吸缺陷型酵母菌最可能是因为无法进行有氧呼吸的第二、第三阶段,使得更多的糖类用于无氧呼吸,所以产生更多的酒精。 答案:(1)在无氧条件下进行酒精发酵(在无氧条件下产生酒精) 有以核膜为界限的细胞核 (2)30℃~35℃ 好氧细菌 (3)② (4)①鉴别 (人工)诱变育种 ②扩大培养 ③有氧呼吸第二、第三阶段 【拓展提升】 1.发酵工程的一般过程分析: (1)从自然界分离菌种:用固体培养基进行筛选。 (2)培育菌种:通过诱变育种、基因工程、细胞工程定向改变菌种,目的是获得优良菌种。 (3)培养基制备:根据培养基制备原则进行。 (4)灭菌:一般用高压蒸汽灭菌。 (5)扩大培养:增加接种时菌种的量,以缩短调整期。 (6)接种:在无菌条件下进行。 (7)发酵过程:随时检测培养情况,使培养保持在稳定期。 (8)分离提纯:用过滤、沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来;代谢产物用蒸馏、萃取、离子交换等方法进行提取。 2.发酵工程要点归纳: (1)影响调整期时间长短的因素:①繁殖速度较快的菌种一般调整期较短;②接种菌种来自对数期,调整期短,甚至没有调整期;③接种到组成相同的培养基比接种到组成不同的培养基中时间显然要短;④接种量增大可缩短甚至消除调整期。 (2)分批培养:将微生物置于一恒定容积的培养基中,且培养基一次加入,不再更换。与连续培养比较,分批培养设备利用率降低,培养周期长。 (3)连续培养提高设备利用率,缩短培养周期,可延长稳定期,提高产量。连续培养使菌体快速增长,及时排出部分有害代谢产物,但不是将代谢产物释放到培养基中。 (4)微生物生长规律的研究对象是群体而非个体,条件是:恒定容积的容器,接种同种细菌,液体培养基,接种量少,适宜条件下培养。 (5)生长曲线横坐标代表时间,纵坐标代表细菌数目的对数。 【对点巩固】 1.(2013·柳州模拟)微生物可以通过改变酶的合成和酶的活性来调节代谢,下列有关叙述错误的是( ) A.酶合成的调节,既保证了代谢的需要,又避免了物质和能量的浪费 B.通过酶活性的调节,使微生物的维生素合成量维持在一定水平 C.酶合成的调节比酶活性的调节更快速、精细,是一种反馈调节 D.增大细胞膜的透性,可解除谷氨酸对谷氨酸脱氢酶活性的抑制 【解析】选C。微生物的代谢方式有酶合成的调节和酶活性的调节。微生物体内的酶有组成酶和诱导酶,前者的合成只受遗传物质的控制,后者是环境中存在某物质的情况下才能合成;酶合成的调节保证了
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